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  • 發布時間:2022-01-28 09:37 原文鏈接: 實驗分析方法HPLC分離固定相基質的形態

    目前HPLC分析中常用的幾種形態的固定相如圖1所示,主要包括全多孔微球、薄売型微球、灌流色譜固定相和整體材料,其中由于全多孔微球固定相具有能夠很好地兼顧柱效、樣品容量、使用壽命等眾多理想的性質,應用最為普遍。WechatIMG81.jpeg圖1 HPLC的微粒類型(a)全多孔微球;(b)薄殼型微球;(c)灌流色譜固定相;(d)整體材料
    綜合考慮柱效、反壓和壽命等方面的因素,在分析型HPLC中約5μm粒徑的固定相應用最為廣泛,1.5~3μm的多孔或無孔微粒在快速分離中顯示出較為明顯的優勢。粒度分布范圍越窄,填充色譜柱床的穩定性越好、柱效越高、壓力降越小,一般要求粒度分布范圍不超過平均值的±50%。對小分子的分離,固定相的孔徑在7~12nm、表面積在150~400m2/g的范圍比較適合;對分子量大于10000Da甚至更大分子的分離,需要采用孔徑大于15nm的微粒,以使溶質能夠進入到微孔結構內部的活性表面,達到更好的分離效果。近年來,隨著超高壓液相色譜儀器的商品化,亞-2μm色譜固定相得到更多的應用。表2中給出了不同性質固定相微粒的應用特性。
    表2 不同性質的固定相微粒的應用特性

    特性

    用途

    5μm全多孔微粒

    大多數分離

    3μm全多孔微粒

    快速分離

    1.5μm薄殼型微粒

    極快速分離(尤其是大分子)

    +50%(均值的)粒度分布

    穩定、重現、高柱效柱、柱壓低

    7~12nm孔徑,150~400m2/g(小孔)

    小分子分離

    15~100nm孔徑,10~150m2/g(大孔)

    大分子分離



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