一、實驗動物常用的外科基本技術
（一）基本操作技術
1. 切開 根據實驗要求確定手術切口的部位及大小。切開時先繃緊皮膚，將刀刃與皮膚垂直，用力要得當，一次切開皮膚全層，切縫整齊而不偏斜。切開皮膚及皮下組織時，一般要求按解剖層次逐層切開，注意止血，避免損傷深層的重要組織器官（圖1，圖2）。
圖1
圖2
2.止血 止血是手術操作中的重要環節。手術過程中止血完善與否，不僅直接影響手術部位的顯露和手術操作，而且關系到手術后動物的安全、切口愈合的好壞以及是否造成并發癥等。術中止血必須準確、迅速、可靠。常用的止血方法有：
（1）預防性止血：術前1～2h內使用一些能提高血液凝固性的藥物，以減少術中出血。常用的預防性止血劑有10%氯化鈣溶液、10%氯化鈉溶液。
局部麻醉時，配合應用腎上腺素，即在1000ml普魯卡因溶液中加入0.1%腎上腺素2ml，利用其收縮血管的作用，達到減少手術部位出血的目的。在四肢末梢、陰莖、尾部手術時，為避免出血過多，可在手術部位的上方纏以止血帶，待手術部位徹底止血后松開。
（2）術中止血：①壓迫止血：手術中出血一般可先用滅菌紗布或擰干的溫熱鹽水紗布按壓片刻，切勿用干紗布擦拭，以減少組織損傷。②鉗夾止血：用止血鉗與血流方向垂直夾住血管斷端，停留一段時間后取下止血鉗。③結扎止血：常用于壓迫無效或較大血管的出血。出血點用紗布壓迫蘸吸后，用止血鉗逐個夾住血管斷端，要夾準、夾牢，但應盡量少夾周圍組織，再用絲線結扎止血。結扎時，先豎起止血鉗，將結扎線繞過鉗夾點之下，再將鉗放平后鉗尖稍翹起，打第一個結時，邊扎緊邊輕輕松開止血鉗，再打第二個結。線結的種類有方結（平結）、外科結和三疊方結（圖3），打結方法有手打結和器械打結兩種（圖4，圖5）。④燒烙止血：以燒熱的烙鐵燒血管的斷端，使血液和組織凝固，從而達到止血的目的。⑤藥物止血：當內臟出血時，可用紗布吸凈積血，然后將止血粉、云南白藥或凝血酶等涂撒在創面上，稍加壓5～10s即可止血。
3. 組織分離法 分離組織的目的在于充分顯露深部組織，造成手術徑路，便于切除病灶。操作時要注意以下原則：①在同一平面上力求一次垂直切開，以保切口邊緣整齊，禁止斜切和鋸切，以減少損傷，便于愈合。②在切開多層組織時，一般應按組織層次分層切開，切口大小應適當。③切開肌肉時，一般應沿肌纖維方向進行。④要確保切口創傷分泌物的順利排出。 組織分離方法有兩種：
（1）銳性分離法：使用刀、剪等銳性器械作直接切割的方法，該法用于皮膚、黏膜、各種組織的精細解剖和緊密粘連的分離。
（2）鈍性分離法：使用刀柄、止血鉗、剝離器或手指等分離肌肉、筋膜間隙的疏松結締組織的方法。
軟組織分離要求按解剖層次逐層分離，保持視野干凈、清楚。原則上以鈍性分離為主，必要時也可使用刀、剪。①結締組織的分離：用血管鉗插入撐開，作鈍性分離。對薄層筋膜，確認沒有血管時可使用刀剪。對厚層筋膜，因其往往內含血管而不易透見，不要輕易使用剪刀。使用血管鉗作鈍性分離時，應慢慢地分層，由淺入深，避開血管。若需用銳器，應事先用兩把血管鉗作雙重鉗夾（有時甚至結扎），再在兩鉗之間切斷。②肌肉組織的分離：應在整塊肌肉與其他組織之間，一塊與另一塊肌肉分界處，順肌纖維方向作鈍性分離，肌肉組織內含小血管，若需切斷，應事先用血管鉗作雙重鉗夾，結扎后才可剪斷。③血管神經的分離：順其直行方向，用玻璃分針小心分離，切忌橫向拉。
4. 縫合法 縫合方法很多，但歸納起來主要有間斷縫合、連續縫合和毯邊縫合（圖6），還有減張縫合、褥式縫合、荷包縫合和“8”字形縫合。間斷縫合是最常用縫合方法，一般組織均可采用；連續縫合常用于縫合腹膜及胃腸道等，較快，并有一定的止血作用；毯邊縫合常用于皮片移植縫合、胃腸吻合時縫合后壁全層等，邊緣對合整齊，有一定止血作用；褥式縫合常用于胃腸道、血管等處的縫合；減張縫合常用于縫合皮膚，可與其他縫合并用，其特點是縫線的進出孔距創緣較遠（2～4cm），或在打結前裝上紗布圓枕，以減少組織張力，防止組織被縫線撕裂；荷包縫合常用于縫合胃腸道小穿孔及包埋闌尾殘端等；“8”字形縫合常用于縫合筋膜、腱膜、肌肉等。
圖6
縫合前，應徹底止血，并清除腔內異物、凝血塊及壞死組織。縫針的入孔和出孔要對稱，距創緣0.5～1cm左右。縫線松緊適宜。打結最好集中于創緣的同一側。必要時考慮作減張縫合和留排液孔。縫合時，必須遵守無菌常規。
外部創口縫線經一定時間后（約7～14d），均需拆除。根據創口縫合情況，可決定分次拆除或一次拆除。創口化膿時，根據治療需要拆除全部或部分縫線。拆線前，在縫合處，尤其在縫線和針孔上，需用碘酒和酒精消毒。拆線時，需注意拆線的方法（圖7）
圖7
（二）基本手術
1.頸部手術
（1）氣管插管術：以家兔為例。術中需使用常用手術器械、絲線、棉球、“Y”形氣管套管、手術臺、20%烏拉坦等。手術前，動物麻醉（20%烏拉坦1g/kg體重耳緣靜脈注射），仰臥位固定，備皮。然后，用解剖刀在頸部，自甲狀軟骨下緣，沿下中線作一長約5～7cm皮膚切口，暴露胸骨舌骨肌。用血管鉗插入左右胸骨舌骨肌之間，作鈍性分離（也可用兩食指分離）。分離時，血管鉗不可插得太深，以免損傷小血管。將兩塊肌肉向兩邊拉開，暴露氣管約5cm。用彎頭血管鉗將氣管與背后的結締組織分開，穿線備用。用解剖刀或手術剪在甲狀軟骨下1cm處的氣管兩軟骨環之間作一倒“T”形切口。切口不宜大于氣管直徑的1/3。如氣管內有血液或分泌物，先用小棉球揩盡，以保證呼吸道通暢。然后，用鑷子夾住切口一角，用適當口徑的氣管套管由切口處向胸端插入氣管內，用備用線扎牢并固定于側管上，以免脫落。
（2）頸部血管分離及插管術：首先剝離神經和血管，在神經或血管附近結締組織中插入大小合適的止血鉗，順著神經和血管走行方向擴張止血鉗，逐漸將其周圍結締組織剝離。分離細小神經或血管時，先用蚊式止血鉗或玻璃分針沿神經或血管走行方向將其周圍的結締組織層層分開，再用玻璃分針將神經或血管完好地分離出來。最后用眼科鑷子在神經或血管的下面穿過一條浸有生理鹽水的細線，以備將神經或血管提起及結扎用。分離術完畢后，用一塊浸有溫熱的生理鹽水紗布蓋在切口組織上，以保持切口部位的濕潤。
1）頸外靜脈-右心房插管術：在急性實驗中，頸外靜脈插管常用于注射各種藥物、取血、輸液和測量中心靜脈壓。兔和狗的頸外靜脈較粗大，是頭頸部的靜脈主干。頸外靜脈分布很淺，位于頸部皮下胸骨乳突肌的外緣。分離時，將皮膚的一側切開，用手指在頸皮膚外面向上頂起，即可看到呈暗紫紅色的頸外靜脈，用鈍頭止血鉗或玻璃分針沿血管走行方向，將靜脈周圍的結締組織輕輕分離。
頸外靜脈插管前，首先準備長短適當、內徑為0.1～0.2cm的塑料管或硅膠管，插入端要剪成斜面，另一端連接輸液或靜脈壓測量裝置。插管時先用動脈夾夾住靜脈近心端，待靜脈充盈后再結扎遠心端。用眼科剪在靜脈上靠遠心端結扎處，呈45°角剪一馬蹄形小口，約為管徑的三分之一或二分之一，插入導管。將備用線打一個結，取下動脈夾，把導管慢慢向右心房方向送至所需長度。測量中心靜脈壓時，兔需插入約5cm，狗插入約15cm，此時導管口在上腔靜脈近右心房入口處，可從中心靜脈壓檢測儀中觀察到液面停止下降并隨呼吸明顯波動，結扎固定導管。如果頸外靜脈用作注射、輸液等，導管一般送入2～3cm即可。
2）頸總動脈的分離與插管：在急性實驗中，頸總動脈導管作測量動脈血壓或放血用。頸總動脈位于氣管外側，其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲狀肌所覆蓋。分離兩條肌肉之間的結締組織，可找到呈粉紅色較粗大的血管，用手指觸之有搏動感，即為頸總動脈。頸總動脈與頸部神經被結締組織膜束在一起，稱頸部血管神經束。用左手拇指和食指抓住頸皮和頸肌，以中指頂起外翻，右手持蚊式止血鉗或玻璃分針，順血管神經的走行方向分離出頸總動脈。操作時應注意頸總動脈在甲狀腺附近有一較大的側支，為甲狀腺前動脈，分離時勿將其切斷。分離過程中，須經常地用生理鹽水濕潤手術野，并拭去附近的血液。為了便于插管或作頸總動脈加壓反射等操作，頸總動脈應盡量分離得長些（大白鼠、豚鼠2～3cm，兔3～4cm，狗4～5cm）。
頸總動脈插管所用導管同頸外靜脈導管，其內充滿肝素生理鹽水溶液。分離的頸總動脈下置兩根備用線，用一根結扎動脈遠心端，將近心端用動脈夾夾住，另一根線打一活結于動脈夾與遠心端結扎線之間。血管切口同頸外靜脈。導管插入動脈管腔1～2cm，然后用線打結，其松緊以放開動脈夾后不致出血為度。結扎固定后再圍繞導管打結固定，以免導管滑脫。未測量前暫勿放開動脈夾。
（3）頸部迷走、交感、減壓神經的分布情況及分離。
1）頸部迷走、交感、減壓神經的分布。①兔：在頸部分離出氣管后，其外側由結締組織的包繞頸總動脈與三根粗細不同的神經而形成血管神經束。最粗者即為迷走神經，呈白色；較細者為頸部交感神經干，呈灰白色，交感神經干有到心臟去的分支；最細者為減壓神經，屬于傳入性神經。其神經末梢分布在主動脈弓血管壁內。減壓神經一般介于迷走和交感神經之間，但其位置常有變異，且變異率很大。②貓：交感神經與迷走神經并列而行，交感神經較細而迷走神經較粗大，減壓神經并入迷走神經中移行。③狗：在頸總動脈背側僅見一粗大的神經干，稱為迷走交感神經干。迷走神經的結狀神經節與交感神經的頸前神經節相鄰。迷走神經于第一頸椎下面進入頸部，與交感神經干緊靠而行并被一總鞘所包，聯合而成迷走交感神經干。
2）頸部迷走、交感、減壓神經的分離方法。其分離暴露方法同頸總動脈。可根據神經的形態、位置和行走方向等特點進行辨認。辨認時可用眼科鑷將頸血管神經束附近的結締組織膜夾住，輕輕拉向外側，或在頸總動脈下穿一根線，輕輕提起，即可看到血管、神經自上而下排列在結締組織膜上。迷走神經和交感神經很容易辨認，而減壓神經僅在兔為一條獨立的神經，較容易辨認，而在人、馬、豬、狗等動物，此神經并不單獨走行，而是行走于迷走交感干或迷走神經中。因減壓神經較細，極易受損傷，故應先用玻璃分針將其周圍組織分離，然后再分離其他神經，分離長度一般為2～3cm長。分離后，置經生理鹽水濕潤的細線于各條神經之下面，各打一虛結后備用。
3）頸部膈神經的分離方法：切開頸部皮膚，分離皮下組織，暴露出氣管和胸骨乳突肌，可見有一靜脈緊貼于皮下走行于胸骨乳突肌的外緣，此為頸外靜脈。用止血鉗輕輕將頸外靜脈和胸骨乳突肌向深處分離，當分離到氣管邊緣時，可見沿后外方走行的較粗的臂叢神經，其內側有一條較細的神經，約在頸部下1/5處橫跨臂叢并與之交叉，向內后走行，即為膈神經，辨清膈神經后，用玻璃分針小心地將膈神經分出1～2cm，于神經下置一線備用。如需在實驗中記錄電位，可小心剝去神經干周圍的結締組織膜，則可以提高記錄電位幅度。
2.胸部手術以家兔為例。由于家兔解剖學上的特點：左右兩側胸腔不通，心臟又在兩側胸膜腔之外的縱隔中。所以很多心臟實驗都利用此特點進行，現介紹一種出血少而又不易使胸膜破損的開胸方法。
家兔仰臥位固定、備皮，沿胸部正中胸骨柄上作局麻，由胸骨柄窩上方1cm向胸骨柄正中作5～6cm皮膚切口。然后將胸骨柄窩上方的頸闊肌進行分離，分離不宜過深，以免損傷靜脈，分離方向緊貼胸骨柄下，用粗剪刀沿胸骨柄正中剪開，若偏離正中易剪破胸膜。最后用粗棉線穿過切開的胸骨柄牽引擴張，充分暴露心臟。
在使用剪刀時，要注意向上挑起，以防剪破胸膜；手術中應盡量減少出血，如出血較多時，先用止血鉗將出血點夾住，再用線結扎止血。
3.腹部手術輸尿管插管術以家兔為例。術中需使用常用手術器械、絲線、棉球、玻璃分針、“Y”形導尿管（可同時插兩側的輸尿管）、兔手術臺、20%烏拉坦等。手術前，將動物麻醉，仰臥位固定，剪去恥骨聯合上腹部的部分被毛。然后，做恥骨聯合上緣向上的下腹部正中切口，長3～4cm。再用手術剪沿腹白線剪開腹壁及腹膜，注意勿傷腹腔內臟器官。尋找膀胱，并將其翻出腹外，在膀胱底兩側找到輸尿管。注意術中用溫熱鹽水紗布覆蓋手術視野，以保持腹腔內溫度與濕度。找到輸尿管后，在輸尿管靠近膀胱處用絲線扣一松結備用，用彎頭小鑷或小指托起輸尿管，用眼科剪在其上剪一小斜口（呈45°角，約為輸尿管直徑的1/2）從小口處向腎臟方向插入導尿管（事先充滿生理鹽水），并用備用絲線固定之，防止滑脫。插好后，可見管內有尿液慢慢流出。插管要輕，防止出血。
4.股部手術
（1）股動、靜脈和股神經分離術：股三角內的血管、神經包括股動脈、股靜脈和股神經，處于一層深筋膜之下。分離時，可用蚊式止血鉗在恥骨肌與縫匠肌交點處小心地沿縫匠肌后部內側緣分離，并將縫匠肌后部輕輕向外拉開，其下方即見深筋膜包圍著的血管神經束。仔細分離深筋膜后，血管、神經即完全暴露。股靜脈位于內側，股神經位于外側，股動脈位于中間（圖8）。用玻璃分針或蚊式止血鉗小心分離各血管、神經之間的結締組織膜，并穿線備用。
圖8 （2）股動、靜脈插管術：在大動物的急性實驗中，為了便于隨時通過動脈、靜脈給藥，故常需要做股動、靜脈插管術。以家兔的股靜脈插管為例。用蚊式止血鉗分離出一段股靜脈，在其下方穿兩條線，一條先在靜脈遠心端結扎，再用小鑷子將近心端靜脈管前壁輕輕提起，用眼科剪直剪，呈45°角，剪開血管直徑的1/3，注意，血管切口面一定要呈倒“V”樣的斜切面然后將靜脈導管插入，并用另一條線將導管固定在靜脈腔內。 如要從股動脈放血或快速注射高滲葡萄糖溶液或輸血時，就須做動脈插管。插管前先要在套管內充滿0.5%肝素，插管方法同上。
二、實驗動物的急救措施
當實驗進行中因麻醉過量、大失血、過強的創傷、窒息等各種原因，而使動物心跳減弱甚至停止、血壓急劇下降甚至測不到；呼吸極慢而不規則甚至呼吸停止、角膜反射消失等臨床死亡癥狀時，應立即進行急救。急救的方法可根據動物情況而定。對狗、兔、貓常用的急救措施有下面幾種。
1.人工呼吸用雙手按壓動物胸廓進行人工呼吸。如有電動人工呼吸器，可行氣管插管后，再連接人工呼吸器進行人工呼吸。一旦動物恢復自主呼吸，即可停止人工呼吸。
采用人工呼吸器時，應調整其容量：大鼠為50/min，每次8ml/kg，即400ml/（kg·min）；兔和貓為30/min，每次10ml/kg，即300ml/（kg·min）；犬為20/min，每次100ml/kg（即2000ml/（kg·min）。
2.針刺針刺人中穴對搶救家兔效果較好。對狗用每分鐘幾百次頻率的脈沖電刺激膈神經效果較好。
3.注射強心劑可以靜脈注射0.1%腎上腺素1ml，必要時直接作心臟內注射。腎上腺素具有增強心肌收縮力，使心肌收縮幅度增大與加速房室傳導速度，擴張冠狀動脈，增強心肌供血、供氧及改善心肌代謝，刺激高位及低位心臟起搏點等到作用。
當動物注射腎上腺素后，如心臟已搏動但極為無力時，可從靜脈或心腔內注射1%氯化鈣5ml。鈣離子可興奮心肌緊張力，而使心肌收縮加強，血壓上升。
4.注射呼吸中樞興奮藥
（1）可從動物靜脈一次注射25%尼可剎米1ml。此藥可直接興奮延髓呼吸中樞，使呼吸加速加深；對血管運動中樞的興奮作用較弱。在動物抑制情況下作用更明顯。
（2）可從動物靜脈一次注射1%山梗茶堿0.5ml。此藥可刺激頸動脈體的化學感受器，反射性地興奮呼吸中樞；同時此藥對呼吸中樞還有輕微的直接興奮作用。作為呼吸興奮藥，它比其他藥作用迅速而顯著。呼吸可迅速加深加快，血壓亦同時升高。
5.動脈快速注射高滲葡萄糖液一般常采用經動物股動脈逆血流加壓、快速、沖擊式的注入40%葡萄糖溶液。注射量根據動物而定，如狗可按2～3ml/kg體重計算。這樣可刺激動物血管內感受器，反射性地引起血壓呼吸的改善。
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