基于不同原理和角度,高效液相色譜柱和固定相可以有不同的分類方式。液固色譜固定相按基質材料可分為無機氧化物、聚合物等主要類型;按結構和形狀分為薄殼型和全孔型,無定形和球形,整體柱等;按固定相表面改性與否分為吸附型和化學鍵合型;按照分離模式可以分為正相、反相、離子交換、疏水作用、體積排阻、親和、手性等類型;按照分離規模及色譜柱的幾何尺寸,可以分為制備柱、分析柱、微型柱等類型。表1中已經給出了按照分離模式分類的原理及適用范圍;表2中列出了柱型與樣品容量的關系。
表1 液相色譜法分類
按固定相形態分類 | 按作用原理分類 | 按物理特征分類 | |||
固定相 | 名稱 | 原理 | 名稱 | 特征 | 名稱 |
液體 | 液-液色譜 | 分配 | 液-液分配色譜 | 平面固定相 | 平面色譜 |
固體 | 液-固色譜 | 吸附 | 液-固吸附色譜 | 紙固定相 | 紙色譜 |
分子大小 | 體積排阻色譜 | 薄層固定相 | 薄層色譜 | ||
離子交換能力 | 離子交換色譜 | 顆粒固定相填充 | 填充色譜 | ||
親和力 | 親和色譜 | 色譜柱中空 | 空心柱色譜 | ||
電滲及電泳 | 毛細管電泳 | 采用高壓流動相 | 高壓液相色譜 |
表2 液相色譜的不同柱型
柱 型 | 柱內徑 | 流動相流速 | 樣品容量 |
制備注 | 4in(≈100mm) | 960ml/min | 2.5g |
制備柱 | 2in(≈50mm) | 240ml/min | 600mg |
制備柱 | 1in(≈25mm) | 61ml/min | 150mg |
半制備柱 | 9mm | 11ml/min | 25mg |
常規柱 | 4.6mm | 0.5~2.0ml/min | 0.2~7mg |
細內徑柱 | 2.1mm | 0.2~0.4ml/min | 0.05~0.2mg |
微柱 | 0.8~1.0mm | 25~60μl/min | 50~500mg |
毛細管柱 | 0.1~0.5mm | 1~15μl/min | 1~50μg |
納米柱 | ≤ 0.1mm | ≤ 1μl/min | ≤ 1μg |