1、高壓
液相色譜法以液體作為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了迅速通過色譜柱,必須對載液施加高壓。在現代液相色譜法中供液壓力和進樣壓力都很高,一般可達到15~35MPa。
2、高速
高效液相色譜法所需的分析時間較經典液相色譜法少得多,一般都小于1h,例如,分離苯的羥基化合物七個組分,只需要1min 就可以完成;對氨基酸分離,用經典色譜法,柱長約170cm、柱徑0.9cm、流動相流速30mL/h,需要20多個小時才能分離出20種氨基酸,而用高效液相色譜法,只需1h 即可完成。載液在色譜柱內的流速較經典液相色譜法高得多,一般可達1~10mL/min。
3、高效
高效液相色譜法的柱效高,約可達3萬塔板/m 以上(氣相色譜法的分離效能也很高,柱效約為2000塔板/m)。這是由于近年來研究出了許多新型固定相(如化學鍵合固定相),使分離效率大大提高。
4、高靈敏度
高效液相色譜法已廣泛采用高靈敏度的檢測器,進一步提高了分析的靈敏度。如紫外檢測器的最小測量可達納克數量級(10-9g),熒光檢測器的靈敏度可達10-11g。高效液相色譜的高靈敏度還表現在所需試樣很少,微升數量級的試樣就足以進行全分析。高效液相色譜法只需要試樣能制成溶液,而不需要汽化,因此不受試樣揮發性的限制,對于高沸點、熱穩定性差、分子量大(大于400)的有機物(這些物質幾乎占到有機物總數的75%~80%),原則上都可以用高效液相色譜法進行分離分析。