1. 實驗前用0.2%過氧乙酸擦凈臺面及四周，放好需用的實驗器材及各種溶液，開紫外燈消毒40-60分鐘。
2. 進入無菌室前應用肥皂洗手，然后用75%酒精球棉將手擦干凈。
3. 進入無菌間必須穿的專用工作服、帽及拖鞋、口罩，應放在無菌室緩沖間，工作前經紫外線消毒后使用。
4. 使用的吸管、平皿及培養基等必須經消毒滅菌，打開包裝未使用的器皿，不能放置再用，消毒用器皿放置不得超過一周。
5. 從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位及試管或平皿邊。
6. 接種樣品必須在酒精燈前操作，接種樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。
7. 實驗完畢，清潔瓷磚臺面。
8. 用過的器材進行整理，污染細菌的器材需經高壓滅菌或煮沸消毒。
9. 實驗者在實驗后用肥皂清洗雙手或將雙手浸泡于0.2%過氧乙酸溶液中3分鐘，用清水沖洗，再用肥皂清洗雙手。
10. 換下的隔離衣、帽等進行高壓消毒，拖鞋放回原處。
11. 用畢，再開紫外燈消毒 40—60分鐘。
12. 無菌室和緩沖間每周大掃除一次，保持整潔。
13. 每月進行一次紫外線對空氣消毒效果測定，如燈管發黑，超過使用期限，及時更換紫外燈管。
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