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  • 發布時間:2021-01-19 09:33 原文鏈接: 家禽中激素含量的測定

    液相色譜儀,紫外檢測器;離心機;旋轉蒸發儀;K-D濃縮器。

    二.試劑

      激素標準貯備液:分別稱取雌三醇、雌二醇、雌酮、睪酮、孕酮0.1000g,用甲醇溶解并定容至100mL,每毫升含各種激素均為1.000mg。

      激素標準使用液:精密吸取一定量的激素標準品和內標貯備液,用甲醇配制成每毫升含各種激素為10.00μg、an眠酮2.00μg和每毫升含各種激素2.00μg、an眠酮2.00μg的兩種標準使用液。

    三.實驗步驟

      1.樣品的處理

      取可食部分,搗成均漿,稱取50g左右置250mL具塞三角瓶中。在上述樣品中加入an眠酮20.00μg/mL的內標貯備液1.0mL,加甲醇+丙酮(1+1)混合溶液150mL,在振蕩器上振搖提取30min。用快速濾紙過濾,殘渣用少量甲醇+丙酮(1+1)混合液洗滌數次,洗液并入濾液中,于旋轉蒸發儀或K-D濃縮器中將溶劑蒸除。殘渣用甲醇20mL溶解,經盛有無水硫酸鈉的漏斗濾入250mL分液漏斗中,再用10mL甲醇分數次洗滌漏斗及內容物,洗液并入濾液中,加pH=5.2的醋酸鈉緩沖液80mL左右,混勻后二氯甲烷50mL、30mL、30mL振搖提取3次。合并提取液并用無水硫酸鈉脫水,在水浴上揮干溶劑,殘渣用甲醇溶解并定容至10.0mL,混勻后,以3000r/min速度離心5min,取上清液供色譜分析用。

      2.液相色譜參考條件 

      ① 色譜柱:HP-ODS 4.6mm×200mm。

      ② 流動相:乙腈+甲醇+四氫呋喃+0.01mol/L 醋酸鈉溶液(20+20+10+50)。

      ③ 流速:1.0mL/min。

      ④ 測定波長:270nm。

      ⑤ 進樣體積:10μL。

      3.樣品測定

      取供色譜測定的樣品溶液10μL,注入液相色譜儀,以內標法定量。




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