各級醫院臨床檢驗應用中非常廣泛的儀器之一就是血細胞分析儀，隨著計算機技術的快速發展和數據處理技術的日新月異，血細胞分析儀的自動化水平和可檢測維度也越來越高，給臨床檢驗帶來了極大的方便性和準確性。筆者在基層醫院的臨床應用中，積累了許多檢測數據和病例，并進行了對比分析，結合實際進一步探究了影響血細胞分析儀測定結果的實踐因素。
1 環境溫度的干擾
實驗室環境溫度決定了儀器、試劑以及標本的溫度,計數時稀釋液的溫度應為( 22±4) ℃ 。當稀釋液的溫度低時,紅細胞溶解后的膜碎片聚集, 粒度分布曲線的平坦段變短,當試劑溫度低于18 ℃時需加熱使用。有些溶血劑在低溫時可出現結晶, 并不容易被察覺,很難引起操作者的注意,但在顯微鏡下, 可見到其中懸浮著許多細小的結晶,這樣的溶血劑滴入血液中,白細胞計數必然增高。我們基層醫院地處北方，這種情況在實際操作中時有發生,尤其是在冬季。血細胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時產生的聚合結晶，常使分析結果出現異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進行加熱，以升高溫度, 消除結晶。還可加入適量的非離子表面活性劑,從而減輕溶血劑結晶的發生。低溫也易激活血小板,引起血小板凝集, 造成血小板計數假性降低。
2 抗凝劑的影響
ABX60血液細胞分析儀檢測EDTA-K2 含量不同的靜脈血,臨床結果表明EDTA-K2 有效抗凝劑量在1.5~ 6. 0mg/ mL時,不影響分析結果。自制抗凝瓶EDTA-K2 用量1.5~ 2.2mg/ mL為宜。低于1. 5mg/mL時抗凝效果欠佳, 出現肉眼不易發現的凝集,可表現為血小板降低。在采血時，一般2mL的采血量,其誤差在± 0. 5mL范圍內的話比較適宜。血量過多或過少都會對結果造成影響,血量過多抗凝不充分,會出現凝塊;血量過少, 會導致抗凝劑過濃。筆者分析認為，由于血細胞遇抗凝劑先有一個短暫的(1~ 2min) 收縮過程, 這是因為鉀離子進入血漿以后,改變了滲透壓,導致水從細胞內流出所致。隨后細胞將鉀離子泵進膜內,細胞又恢復原態。絕大部分患者的標本這一時間只需要幾分鐘, 但也有人需要20~ 30 min。抗凝劑過濃會延長這個平衡時間。
3 標本放置時間的影響
筆者通過觀察總結，發現標本存放3~ 6 h對多數血液分析參數均有不同程度的影響, 主要影響WBC和PLT 結果。但有部分標本在放置的8h內大部分參數沒有顯著改變， 而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內卻有明顯增高。筆者認為，標本放置時間過長會導致細胞分層, 分層的細胞會產生不同的代謝物,形成微環境,此時, 細胞的體積與其周圍的微環境相適應, 重新混勻后需重新建立平衡, 最初的1~ 2min收縮,達到平衡約需30min。這一現象對血脂較高的標本影響更為顯著。
測定時間對血小板的影響更為顯著,在一定的時間段內, 隨著時間的延長, 抗凝劑與血液充分溶融, 松散聚集的血小板逐步解聚,血小板數值逐步升高。實際操作中, 由于急需報告結果(尤其是急診標本) 而使待測時間縮短, 往往導致血小板計數結果偏低。
4 生理和病理因素的干擾
在臨床實踐中,筆者有時會發現應用血細胞儀對新生兒血液進行分析時,使用正常量溶血劑計數白細胞, 各項結果與實際有差異。筆者認為, 由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態,其紅細胞數和血紅蛋白都高( Hb> 200g/ L)。常規溶血劑用量不能將紅細胞完全破壞, 加大溶血劑用量, 可以使白細胞正確分類, 計數準確。因此, 在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結果的關鍵。
病理因素也可影響血液分析的結果, 在某些疾病的影響下,當平均紅細胞體積小于70fL時,血小板計數假性升高, 這時需用顯微鏡人工計數才能得到準確的結果。
5 采血因素的影響
自動血細胞分析儀要求靜脈采血,且一針見血。若采血技術不熟練,不能一針見血, 致使采血時間過長,混入組織液成分及血液長時間滯留于采血器中, 容易引起血小板的活化和聚集,形成肉眼不易察覺的微小凝塊, 致使血小板計數結果假性降低。采血后應及時混勻, 使抗凝劑與血液充分接觸, 發揮抗凝作用。對于末梢血( 手指血) 的采取, 則影響因素更大, 采血時如穿刺不深,擠壓過甚,導致血小板凝聚, 組織液滲入等, 最終致使結果不準確。所以采取末梢血時, 穿刺要深, 盡量使血液自然流出,盡量避免用力擠壓。由于采血不當, 而引起的溶血對血小板計數結果也會有影響, 常使血小板計數增高。通常血小板和紅細胞在20~ 30fL之間有重疊。計數血小板時易受小紅細胞以及紅細胞碎片的影響, 而使血小板的計數假性增高。因此,臨床檢驗中發現溶血標本,應重新采血或顯微鏡進行血小板直接計數可使結果可靠。
綜上所述,血細胞分析儀在臨床使用過程中有著手工法無可比擬的優點,但也存在著許多干擾因素,不同程度地導致分析結果的不可靠,因此在實際工作過程中,涂片顯微鏡檢查顯得格外重要。儀器是由人來操作的,實驗人員的思想和技術素質是實驗的保證,實驗人員必須有一定的理論知識、實踐經驗和高度的責任心,保證儀器正常運轉,保證結果準確、可靠,才能為臨床提供科學、真實的依據。