（1）首先尋找溶血的證據及代償增生的證據，以確定溶血的存在
溶血的證據：
①血紅蛋白下降，外周紅細胞變形、破碎；
②血清間接膽紅素增高；
③血管內溶血可見血紅蛋白尿及血紅蛋白血癥（血漿肉眼呈粉紅色）及含鐵血黃素尿。
骨髓代償增生的證據：
①網織紅細胞明顯增多；
②外周血涂片有核紅血細胞、點彩及啫多染紅細胞，粒細胞增多，有核左移，偶出現類白血病反應；
③骨髓增生明顯活躍。以紅系為主。
（2）確定病因的診斷：
①紅細胞膜的異常：外周紅細胞形態異常，出現球形紅細胞、橢圓紅細胞或口形紅細胞。可行紅細胞滲透脆性實驗、酸化甘油溶解實驗、紅細胞膜蛋白分析確診。
②紅細胞酶的異常：可做多種紅細胞酶的測定，如G-6-PD酶、丙酮酸激酶等。
③血紅蛋白的異常：血涂片可見靶形紅細胞。可行血紅蛋白電脈及抗堿血紅蛋白測定。
④免疫性溶血：紅細胞表面抗體測定及抗人球蛋白（Coombs’）試驗，陽性可明確為免疫性貧血；陰性可能為紅細胞膜異常、紅細胞酶異常、血紅蛋白異常以及藥物、理化因素、感染等。