根據有溶血的臨床表現，抗人球蛋白試驗陽性，即可作出診斷，診斷成立后，還應進一步確定是原發性或繼發性，對此，可結合臨床表現進行考慮，在有些繼發性AIHA患者，其原發病常在出現溶血性貧血之后才出現，因此，長期追蹤觀察，可及時發現原發病，此外，血清學檢查結果也可能有助于原發性與繼發性AIHA的鑒別，一般而論，IgG型多見于慢性原發性患者，而IgM型與補體型多見于繼發性患者，對于抗人球蛋白試驗陰性的可疑病例，其診斷依據主要依靠臨床表現和腎上腺糖皮質激素的治療反應來判斷，如用腎上腺糖皮質激素后有效，結合臨床上亦可考慮本病，冷凝集素病和PCH的診斷，除根據臨床表現和抗人球蛋白試驗外，前者冷凝集素試驗陽性，后者冷熱溶血試驗陽性，均具有確診意義。