實驗概要
通過人工摩擦接種方法,學習常規的汁液接種技術。
實驗原理
植物病毒不同于真菌和細菌,屬于被動侵入寄主的類型。在自然界里大多依靠機械摩擦或生物介體完成傳播。故在實驗室中常用病株汁液作為人工接種的材料,將其有效地接種到試驗材料上。
主要 試劑
0.2M PB: 0.2M Na 2 HPO 4 .12H 2 O,取71.628g/L。
0.2M NaH 2 PO 4. 2H 2 O,取31.202g/L。
用時稀釋10X即可。
實驗步驟
將小麥種子播種在滅菌的40目細沙或滅菌土中,25℃左右培養出苗,在苗高5~7cm仍呈一葉時接種(苗不能太大,太大不易接種且浪費接種液,太小不易攏在一起接種)。接種前先置 于12~14℃預培養一天。
2. 接種時取一定量的發病小麥葉片,剪碎,加小量金剛砂和一定量的0.02M PB快速研磨成汁。(越快越好,因病毒在汁液中不穩定。)
3. 在待接種的小麥葉片上噴灑金剛砂,戴一次性PE手套,左手將5~8棵小麥葉片攏在一起,右手蘸取汁液快速有力的摩擦葉片,至葉片汁出。(快且力量大又不能將苗拔斷。)
4. 接種后將苗放于20~25℃恢復一天,轉于12~14℃培養觀察發病狀況。
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