中文名：小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒
別名：小鼠白介素-5(IL-5)ELISA Kit
保存溫度：2-8℃低溫保存
有效期：6個月
試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。
預期應用：ELISA法定量測定人血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中IL-52含量。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。
實驗方法： 酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
適用范圍：只作科研使用，不作臨床使用。
本司ELISA試劑盒具有以下優勢：
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質，應用酶免吸附技術進行比色測定，依據光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6.可以大規模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術都能在較短時間內完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產應用單位均易購置。
小鼠白介素-5(IL-5)ELISA檢測試劑盒基本原理：
①抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學活性；
②抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，仍保持其免疫學和酶學活性；
③酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
小鼠白介素-5(IL-5)ELISA檢測試劑盒試劑準備：
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
1. 標準品復溶：試劑盒提供6管標準品，每管已標定濃度，并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動助其溶解，使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠白介素-5(IL-5)ELISA檢測試劑盒組成及試劑配制：
1、 酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）：
2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,000
pg/ml，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成1,000 pg/ml，500 pg/ml，250
pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml，15.6 pg/ml，樣品稀釋液直接作為空缺孔 0
pg/ml。如配制500 pg/ml標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）1,000
pg/ml的上述標準品加進含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
6、 檢測溶液A：1×120 /瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋（如：10 檢測溶液A / 990 檢測稀釋液A），充分混勻，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（100 /孔），實際配制時應多配制 0.1-0.2ml。
7、 檢測溶液B：1×120 /瓶（1:100）。臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8、 底物溶液：1×10ml/瓶。
9、 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5張
12、使用說明書：1份