小鼠神經干細胞分化為神經元

實驗概要

小鼠神經干細胞分化為神經元

主要試劑

無菌水、DPBS、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、細胞基礎培養液、 PDL、laminin、小鼠神經分化培養液（Neuron M）

主要設備

4孔板、12mm細胞培養玻片

實驗步驟

① 在4孔板每個孔中放置一塊12mm細胞培養玻片，每孔加入100ug/mL的PDL500μL，室溫靜置過夜。
② 吸去PDL，用無菌水沖洗玻片，室溫靜置晾干；每孔加入10ug/mL的laminin500μL，37℃、5%CO2靜置過夜。
③ 將小鼠神經干細胞以0.05%的胰蛋白酶消化2 min，以等體積的10%FBS終止，1000 rpm離心5 min，棄上清并用Neuron M重懸細胞，以細胞密度為1×10⁴個/ml接種于棄除laminin的四孔板。
④ 每隔2天半量更換Neuron M，到第21天時，分化完成，可在鏡下觀察到神經元細胞與神經絲。