實驗概要
小鼠神經干細胞的流式分析及收集
主要試劑
神經干細胞培養液
主要設備
流式細胞儀、移液槍、流式細胞管
實驗步驟
(1)在上流式細胞儀器前輕輕混勻樣品。為了分析和收集細胞,通過調整前向散射范圍(FSC-A)和側向散射范圍(SSC-A)來調整細胞門以去除細胞碎片,留下需要的細胞;設置FSC-A和前向散射寬度(FSC-W)去除細胞團塊。通過檢測管中PI陽性細胞比例確定死亡細胞的比例。如果死亡細胞比例在可以接受的范圍內,設置FSC-A和SSC-A去除細胞碎片。
(2)分離篩選CD133陽性細胞。把收集到的細胞直接轉入流式細胞管中,加入1~2 mL神經干細胞培養液。
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