1 原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的鹽酸克倫特羅（Clenbuterol，CLE），試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的鹽酸克倫特羅和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗鹽酸克倫特羅抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含鹽酸克倫特羅含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中鹽酸克倫特羅的殘留量。
2 技術指標
2.1 試劑盒靈敏度：0.05ppb(ng/ml)
2.2 反應模式：25℃，30min～15min
2.3 檢測下限：
尿液……………………………0.05ppb
組 織（處理法一）……………0.2ppb
組 織（處理法二）……………0.05ppb
飼料……………………………0.5ppb
2.4 交叉反應率：
克倫特羅………………………100%
特普他林………………………<1%
馬布特羅………………………<1%
溴布特羅………………………<1%
沙丁胺醇………………………<1%
萊克多巴胺……………………<1%
2.5 樣本回收率：
尿樣……………………………95%±10%
組織、飼料……………………85%±15%
3 試劑盒組成
酶標板……………………………96孔
標準液：各1ml
0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
高標準液（紅蓋）：100ppb………1ml
酶標記物（紅蓋）…………………5.5ml
抗體工作液（藍蓋）………………5.5ml
底物液A（白蓋）……………………6ml
底物液B（黑蓋）……………………6ml
終止液（黃蓋）………………………6ml
20X濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml
10X復溶液(黃蓋)…………………50ml
說明書………………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器：CSY-E96SR瘦肉精快速檢測儀、均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道300μl
4.3 試劑：氫氧化鈉、乙酸乙酯、濃HCl、乙腈、甲醇、正己烷、無水硫酸鈉
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知：
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結果。
5.2 配液：
配液1：0.1M HCl 溶液
取0.86ml濃HCl加去離子水至100ml。
配液2：0.1M NaOH 溶液
稱取0.4g NaOH加去離子水至100ml。
配液3：乙腈-0.1M HCl 溶液
V乙腈:V0.1M HCl =84:16。
配液4：復溶液
將10×復溶液用去離子水10倍稀釋，用于樣本的復溶，復溶液在4℃環境可保存一個月。
5.3 樣本前處理步驟：
5.3.1 尿樣處理方法：
直接取50μl清亮尿樣進行測定（渾濁尿樣需要過濾或經4000r/min離心5min，以得到清亮尿樣），暫不使用的樣本應冷凍保存。
尿樣本稀釋倍數：1 檢測下限：0.05ppb
5.3.2 組織樣本處理方法一：
稱取均質后的組織樣本2±0.05g ，加入6ml復溶液，充分振蕩2min，室溫4000r/min以上離心10min (若組織樣本中油脂含量較高，可在振蕩后放入85℃水浴10min后再離心)。取50μl上清液進行分析。
樣本稀釋倍數：4 檢測下限：0.2ppb