尿液分析儀與顯微鏡檢驗尿液潛血的比較分析

　　尿液檢驗中，尿液潛血檢查是一項必查內容，常用的檢驗方法有尿液分析儀潛血檢驗和顯微鏡檢查尿液紅細胞兩種。傳統方法為后者，但隨著科技的進步，被尿液分析儀法逐漸以其簡單、高效的特點所取代，但尿液分析儀也有其不夠精確的缺點。本文通過對兩種方法的切實比較，找出它們的優缺點，提出合理的使用建議。1　資料與方法1.1　一般資料　隨機選取在我院進行尿檢的患者尿液樣本180例，男性112例，女性68例。15分鐘內同時進行尿液分析儀和顯微鏡的檢驗。1.2　尿液分析儀1.2.1　儀器　DIRUIH-800型尿液化學分析儀，所用的試紙是同一公司的DIRUIH12-800，100人份/筒。1.2.2　原理　據多聯試帶上各模塊與尿液成分發生化學反應后顏色變化的深淺來檢測尿液中的某化學物質，如直接檢測紅細胞、白細胞的胞質內涵物，間接推斷細胞的有無，這種方法叫干化學試紙法。若尿液中含有血紅蛋白(Hb)，Hb中亞鐵血紅素所含的過氧化物酶樣物便能夠與試紙模塊上的過氧化物產生反應分解釋放新生態氧[O]，氧化底物鄰甲苯胺成為鄰聯甲苯胺，試紙條上的模塊顏色發生變化，由黃色變為草綠色，再變為深藍色，由顯色的強度可以得知尿液中Hb的濃度。1.2.3　檢驗方法　取10ml尿液樣本，浸入尿試紙條1s后取出，在尿液分析儀上進行測定，自動打印結果。報告為：-、+/-、+、++、+++、++++。1.3　顯微鏡檢驗1.3.1　儀器　日本奧林巴斯（OLYMPUS）電鏡顯微鏡。1.3.2原理　顯微鏡具有放大作用，用高倍鏡觀察RBC的形態并計數。直接觀察尿沉渣中的紅細胞，是對紅細胞最真實最直觀的反映[1]。1.3.3　檢驗方法　取10ml尿液樣本，放入試管中，以1500r/min離心5min，去掉上清液，留取沉淀0.2ml。充分混勻，取約20μl滴在載玻片上，加蓋玻片，制成2.0cm×2.0cm的標本在顯微鏡上觀察。起初為避免漏掉有意義的物體，用低倍鏡在教弱的光線下觀察標本全貌，后用高倍鏡仔細辨認細胞，尋找紅細胞。鏡下看到一個以上的紅細胞為陽性。2　結果 
　　用顯微鏡和尿液分析儀同時對180分尿液樣本進行潛血試驗檢查，結果如下：2.1　兩種檢驗方法的陽性率比較　顯微鏡檢驗尿液樣本陽性51例，陰性129例，陽性率為28.3%；尿液分析儀檢驗尿液樣本陽性62例，陰性118例，陽性率為34.4%。具體見下表1。 
　　表1 兩種檢驗方法的陽性率比較2.2　兩種檢驗方法紅細胞結果比較　以鏡檢有無紅細胞作為尿液分析儀潛血檢測判斷結果，顯微鏡下觀察尿沉渣中的紅細胞。結果顯示，尿液分析儀潛血檢驗的敏感度為92.16%，假陽性率為7.84%，假陰性率為11.63%。具體數據見下表2。 
　　表2 兩種檢驗方法紅細胞結果比較3　討論3.1　顯微鏡檢驗　顯微鏡檢驗是傳統的尿液檢查方法。將經過離心沉淀后的尿有形成分，放在顯微鏡下進行鏡檢。這種檢查方法比較落后，但準確率高。其缺點為費時費力、重復性差、不能定量、受人為因素影響大、無統一質控物、難以進行室內質控等[2]。3.2　尿液分析儀檢驗　尿液分析儀是一種采用光學、電子學、計算機技術等領域先進技術的組合式尿液分析裝置。具體操作為對浸濕檢測尿液既得結果的多聯試紙發生的顏色反應進行掃描，將光信號轉換成電信號，電子系統再將電信號接收，利用計算機處理并進行計算得到結果。此種利用的干化學反應原理，主要檢測人體尿液中的PH值、亞硝酸鹽、潛血、酮體、膽紅素、尿膽素原、尿比重、白細胞、維生素、葡萄糖、蛋白質等指標。浸入尿液后的試條上的試紙塊與試條筒上的標準色澤進行目測對比，能從顏色上分辨及定性。這種方法具有測定速度快、操作簡便、重量輕及體積小的優點。由于操作中首先要離心，而離心速度過快，可破壞有形成分，離心速度過慢，當每毫升尿液中的紅細胞在5000個以下時，沉渣中便可能根本找不到紅細胞，使檢驗結果有誤。因而在對檢驗結果有懷疑時，可用潛血反應證實。另外，使用尿液分析儀還有其它原因容易造成假陽性和假陰性。3.2.1　假陽性　概念：尿液分析儀潛血反應陽性，而鏡檢呈陰性。常見的原因有： 
　　①血紅蛋白(Hb)：尿液分析儀與完整的紅細胞和RBC溶解釋放的Hb都能發生陽性反應，而顯微鏡只能觀察到完整的紅細胞。健康人尿中Hb含量很少幾乎沒有，尿液分析儀和顯微鏡檢驗都定性為陰性。而疾病時，尿中的Hb可能是發生血管內溶血，血漿Hb超過了結合珠蛋白的結合能力而產生的Hb也可能是尿路出血，紅細胞在高滲或(和)低滲狀態時破壞Hb逸出，此時尿液分析儀定性為陽性，而顯微鏡尿沉渣檢驗看不到完整紅細胞，只有紅細胞的碎片，所以定性為陰性。②肌紅蛋白(Mb)：肌紅蛋白(Mb)分子中含有的血紅素基團具有過氧化物酶活性，尿液分析儀也能發生陽性反應。Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中，健康人人尿中含量甚微，不能檢出，二者皆定性為陰性。而發生嚴重損傷心肌或骨骼肌的疾病時，血漿中Mb增高，經腎臟排泄后使尿液Mb含量增高，故尿液分析儀潛血反應呈陽性，而顯微鏡檢紅細胞仍為陰性[3]。③菌尿：泌尿系感染后，尿中存在細菌，大多數的革蘭陰性菌和某些革蘭陽性菌釋放的過氧化物酶活性物質及繁殖過程中合成觸酶、過氧化物酶和超氧化物歧化酶等物質，能使試帶中的過氧化氫茴香素或過氧化氫稀枯分解出游離氧，造成尿液分析儀檢驗陽性結果，而鏡檢紅細胞為陰性。④其他物質：熱不穩定酶、次氯酸鹽等某些氧化性污染物，都能使試劑塊發生顏色改變，出現潛血反應陽性，鏡檢陰性。⑤標本問題：長時間存放及高溫使標本不新鮮，潛血反應陽性率可相對增高，而鏡檢紅細胞卻相應減少為陰性。有人建議尿液標本存放時間不超過4h[4]。⑥尿液分析儀：尿試紙條若過期后仍然使用、被污染、不妥善保存、操作方法不正確等，均可造成測試結果假陽性。分析儀靈敏度過高，“級差”范圍太大，出現儀器測試為陽性，鏡檢測試紅細胞為陰性，臨床上又找不到任何導致血紅蛋白尿原因的情況。3.2.2　假陰性　概念：顯微鏡檢查陽性，而尿液分析儀潛血反應呈陰性。常見的原因有： 
　　①還原性物質：維生素C等大量還原性物質能競爭性奪取氧化反應產生的，抑制試紙模塊的氧化反應使其不顯色，尿液分析儀潛血檢測陰性，而尿沉渣顯微鏡中可見紅細胞為陽性。②高比重、高蛋白尿：使尿液分析儀試紙模塊潛血檢測的靈敏度降低，其潛血檢測陰性，而鏡檢可見紅細胞為陽性。③尿液中黏液成份增多：紅細胞被大量黏液包裹起來,試劑接觸不到Hb，使尿液分析儀潛血檢測陰性，而鏡檢RBC陽性。 
　　總之，尿液分析儀具有無污染、快速、簡便、高效、結果準確的優點，最適用于對初診病人及健康檢查使用，也可用于已確診疾病的療效觀察，但容易產生假陽性和假陰性。而顯微鏡檢查不但可以排除大多數的假陽性和假陰性，還可以發現各種異常RBC，是對尿液分析儀潛血檢測的一個很好的補充。兩者結合進行，達到對尿實驗的必須指標進行全面的分析。