島津UV一1800型分光光度計硬件的基本操作

分光光度計的使用比較簡單，以下以島津UV一1800型分光光度計為例加以簡單說明，該儀器可以使用主機上按鍵操作，也可使用計算機軟件進行操作。

(1) 開機檢查儀器的各個調節鈕的位置是否在正確的位置上，檢查確定樣品室與池架上沒有放置任何物品，打開儀器電源 (將開關打向“I”側) ，開始執行各種自檢及初始化。儀器通過后，使之預熱30min，隨后即可通過使用主機上按鍵進行測試操作。

如使用計算機軟件進行操作時，需開啟打印機、顯示器及計算機主機電源，并在UV一1800主機的模式菜單中，按主機面板上按鍵F4功能鍵進入PC控制。運行UV Probe 2．31工作軟件，點擊【Connect】鍵，連接UV一1800和計算機。

(2) 設置測量方式 UV一1800型分光光度計有多種測量功能，包括動力學測定方式、光度測定 (定量) 方式和光譜測定等。測量前應首先選擇測量方式，對于常規的定量分析，應選取光度測定 (定量) 方式。使用UV一1800主機上按鍵時，按鍵上有數字鍵0～9或者功能鍵F1～F4，可以根據測試需要選擇屏幕上不同的模式與設置。選擇模式或設置時，在按下數字或功能鍵之后，不用按ENTER鍵；當輸入數值，比如波長設置或者顯示模式等，必須按ENTER鍵設置該值。如使用軟件菜單操作，具體的測量方式選擇操作方法如下。

① 點擊【Kinetics】鍵進入動力學測定方式：一般測定吸收值隨時間的變化，通常用于酶反應隨時間的變化。

② 點擊【Photometric】鍵進入光度測定 (定量) 方式：可進行多波長、單波長、峰高定量。校準曲線可使用多點、單點、K因子等方法。

③ 點擊【Spectrum】鍵進入光譜測定方式：可進行紫外-可見光-近紅外區的光譜測定。

(3) 其它參數的設定 點擊菜單欄上的【M】鍵，點擊【Measurement】標簽，根據提示在對話框中選擇波長測定范圍、掃描速度、采樣間隔等參數；點擊【Instrurrlent Parameters】標簽，選擇測定種類 (吸收值、透射能量、反射率) 及通帶 (狹縫) 等條件。

(4) 吸光度的測量先點擊【Baseline】進行基線校正，點擊【Auto Zero】鍵進行儀器調零，打開樣品室蓋，將盛有溶液的比色皿分別插入比色皿槽中，將參比樣品推 (拉) 入光路中，再蓋上樣品室蓋。點擊【Start】鍵即開始測定。完成后，取一個文件名并保存。
點擊菜單欄上的【Report】鍵，根據需要選擇報告格式。點擊菜單欄上的【Print Preview】鍵預覽，點擊菜單欄上的【Print】鍵，打印輸出報告。

(5) 關機在UV Probe界面上點擊【Discorlnect】鍵，并退出操作軟件。關閉UV一1800主機的電源開關 (將開關打向“O”側) 。關閉計算機主機、打印機、顯示器及總電源。取出樣品池，并將樣品池清洗并擦干，置于其專用的盒子。

(6) 比色皿的使用方法 比色皿的使用不當，不僅會大大降低分光光度計測量結果的準確性，給測量結果帶來較大的誤差，而且可能會損傷比色皿，縮短其使用壽命。

① 拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要接觸比色皿的透光面，以免沾污。

② 裝盛樣品時先向比色皿倒入少量的待測樣品進行潤洗，再加入其待測樣品。以池體的3／4為度，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，應無溶劑殘留。當待測樣品濃度梯度較多，建議按濃度由低到高的原則，依次向比色皿加入待測樣品。

③ 吸收池放入樣品室時應注意方向相同。樣品溶液放入儀器測量前應注意消除比色皿壁的氣泡，并用鏡頭紙或柔軟的棉布擦拭水珠。吸收池使用后，用擦鏡紙或軟棉織物擦去水分。

④ 測量揮發性或腐蝕性樣品時，吸收池應加蓋。

⑤ 吸收池使用完畢，應立即洗凈并用蒸餾水沖洗清潔，并用干凈、柔軟的綢布將水跡擦凈，以防止表面光潔度破壞影響吸收池的透光率。若吸收池透光內壁沾污，可用柔軟綢布，滴上酒精液后，輕輕摩擦，再用蒸餾水沖洗清潔擦凈，晾干防塵保存。

⑥ 盡量使用同一比色皿進行標準溶液與樣品溶液的測定，以克服不同比色皿本身吸光差異造成的誤差；同厚度多個比色皿同時使用時，在進行測試前均應進行校正和檢查比色皿是否配套。具體方法為：分別向被測的比色皿里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，如石英比色皿裝蒸餾水在220nm處，將某一比色皿的透光率比值調至100％，測量其它各比色皿的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0．5％的范圍內則可以配套使用，若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。同樣地，可檢查石英比色皿的700nm處或玻璃比色皿 (只供340nm以上波長處) 。