圖6. 成分10 在ESI 負離子模式下的多級質譜圖。
圖7. 成分11 在ESI 負離子模式下的多級質譜圖。
對于成10 而言，三級質譜圖含有特征性基峰離子m/z191.05588，對于成分9 和11 來說，特征性碎片離子m/z173.04544 為基峰離子，由碎片離子相對豐度可知成分9，10 和11 分別為4,5- 二咖啡酰奎寧酸4,5-di-O-caffeoyquinic acid；3,5- 二咖啡酰奎寧酸3,5-di-O-caffeoyquinic acid；和3,4-二咖啡酰奎寧酸3,4-di-O-caffeoyquinic acid。
利用Obitrap Elite 對樣品中的各個色譜峰進行了精確分子量測定，并在1 ppm 的質量偏差范圍內擬合出唯一可能的元素組成，再結合多級質譜的碎片裂解規律和數據庫的篩查，在巴西蜂膠樣品中共鑒定出27 個主要成分，其結構和主要的碎片離子分別如圖8 和表1 所示。
圖8. 巴西蜂膠樣品中鑒定出的27 個成分的結構式。
表 1. 巴西蜂膠樣表品1. 中巴西鑒蜂定膠出樣的品中2鑒7 個定出成的分2其7 個主成要分的其主碎要片的離碎子片離和子化和合化物合名物名稱。
3 結論
3.1 Thermo Scientific Orbitrap Elite 質譜儀將雙壓線性離子阱與高分辨的準確質量數（HR/AM）Orbitrap 檢測技術相結合，提供優異性能和出色多功能性。其多級質譜MSn 能力有助于同分異構體的鑒定，如本實驗中的4,5- 二咖啡酰奎寧酸，3,5- 二咖啡酰奎寧酸，和3,4- 二咖啡酰奎寧酸而言，可通過三級質譜圖中碎片離子相對豐度加以區別。
3.2 本實驗中乙酸乙酯：甲基叔丁基醚（1 : 1）和甲基叔丁基醚：甲醇（9 : 1）提取出的樣品成分相似。乙醇：水（8 : 2）在9 min 前出現了一些酚酸類化合物，其提取效率較高。
3.3 在巴西蜂膠膠囊樣品中聚乙二醇輔料干擾的情況下，通過Orbitrap Elite 獲得的多級質譜，仍從中共鑒定出27個主要成分，包含11 個黃酮類化合物，15 個酚酸類化合物，和1 個有機酸類化合物。本實驗中鑒別出的阿體匹林C （Artepillin C） 和Drupanin 可作為巴西蜂膠質量控制方面的標記物。此分析方法可以用于蜂膠的化學成分的分析和商業上巴西蜂膠制品的質量鑒定。