布魯克舉辦先進質譜技術加速生物藥物研發研討會

　　分析測試百科網 2019年4月30日，布魯克公司在上海博雅酒店舉辦“先進質譜技術加速生物藥物研發研討會”。在本次會議上，分析測試百科網采訪了布魯克生命科學執行副總裁Rohan Thakur，美國安進公司資深科學家崔衛東博士和布魯克·道爾頓制藥/生物制藥商務總監Michael Greig。

　　大分子生物藥物結構復雜，特異性強，研發人員在生物工藝控制和產品表征中一直面臨著巨大的挑戰。質譜技術作為強大的分析工具，在藥物研發早期、生物工藝控制和產品表征中具有舉足輕重的作用。布魯克在生物制藥領域一直致力于開發質譜新技術和基于質譜技術的藥物表征新方案，以提高藥物研發的效率。

　　在此次研討會上，布魯克·道爾頓蛋白組學和生物制藥應用主管劉先明，美國安進公司資深科學家崔衛東博士，布魯克·道爾頓制藥/生物制藥商務總監Michael Greig，上海藥明康德新藥開發有限公司分析服務部大分子組組長夏思敏博士，布魯克·道爾頓全球質譜成像市場經理Shannon Cornett分別為參會者帶來精彩的演講報告。

布魯克·道爾頓蛋白組學和生物制藥應用主管 劉先明

美國安進公司資深科學家崔衛東博士

布魯克·道爾頓制藥/生物制藥商務總監 Michael Greig

上海藥明康德新藥開發有限公司分析服務部大分子組組長 夏思敏博士

　　在本次會議上，分析測試百科網采訪了布魯克生命科學執行副總裁Rohan Thakur，美國安進公司資深科學家崔衛東和布魯克·道爾頓制藥/生物制藥商務總監Michael Greig，就質譜技術在藥物開發中的應用談談他們的幾點看法。

　　Q：布魯克可以提供哪些特別的制藥解決方案？

　　Rohan Thakur：我們有很多特別的生物制藥的解決方案。我們可以提供分辨率最高的QTOF產品，利用超高分辨率能夠測量到非常精確的大分子蛋白的分子量，比如maXis II QTOF可以實現50 kDa蛋白的同位素分辨，質量誤差小于1 ppm。MALDI-TOF是Bruker拳頭產品之一，基于MALDI-TOF的藥物高通量篩選方案每天可以篩選大于5萬個樣本。我們有淌度分辨率最高和MSMS采集速度最快的timsTOF Pro，利用其超高的靈敏度可以進行HCP深入分析，解決有些情況下樣品量太少的難題。我們的MRMS也是一個功能非常強大的質譜，從藥物的早期篩選到藥物的DMPK都能提供前所未見的信息。

　　Q：是什么讓布魯克 MRMS系統成為Native MS篩選的理想選擇？

　　Rohan Thakur：MRMS結構設計上就專門針對大分子分析做了特殊的設計，能夠保障離子傳輸和能量的平衡，保證做Native MS的時候蛋白質結構不被破壞，蛋白復合物能夠緊密結合在一起。Native MS的優勢是保證蛋白的天然構像，MRMS從設計上來說能很好匹配這個應用。

　　Q：使用質譜進行HCP（宿主殘留蛋白）分析有哪些挑戰？

　　Michael Greig：利用質譜方法表征HCP主要有三個挑戰，第一個挑戰是HCP因為是主要蛋白產品的副產物，含量非常低，HCP檢測會受到主要蛋白產品的影響；第二個挑戰是HCP動態范圍非常寬，并且含量都在ppm級，甚至低于ppm級，質譜如果沒有足夠的靈敏度就很難檢測并鑒定低含量的HCP，第三個挑戰在于分析通量的問題，如果采用傳統的基于Shot Gun蛋白組學方法，為了有足夠的覆蓋深度，通常會拉長色譜梯度，得到覆蓋深度的同時，確影響了分析通量并增加了分析成本。

　　Q：基于MRMS的Native MS和Top-down方法如何幫助蛋白質藥物開發？

　　崔衛東：Native MS和Top-down結合起來進行蛋白高級結構研究，在學術界是一個非常前沿的領域，比如膜蛋白復合物的研究。在藥物的早期發現階段這個方法已經有在使用，比如Ronald Quinn教授昨天介紹過的FBDD（Fragment Based Drug Discovery）方法用于藥物的快速篩選，進一步還有Jeo Loo教授昨天在報告里講述的用native top-down定位藥物和蛋白的結合位點。現在也有用MRMS分析單克隆抗體藥物和ADC藥物的文章發表，MRMS超高的分辨率可以在完整蛋白水平提供一些不同的信息；基于MRMS的Native MS和Top-down的新的蛋白藥物表征方法也正在探索當中，目前，已經有結合液相分離方法和Native MS來表征抗體藥物的報道，在此基礎上引入top-down fragmentation應該是該領域很自然的下一步。

　　Q：timsTOF Pro對HCPs分析有哪些優勢？

　　Michael Greig：布魯克的timsTOF Pro采用雙TIMS（捕集離子淌度譜）和PASEF技術（平行累積連續碎裂），在時間和空間上對離子進行聚焦，并能實現近100% Duty Cycle，從而帶來掃描速度和靈敏度同時提升，并且在提高掃描速度的同時，MS和MS/MS譜圖依然保持超高分辨率，這些獨特的性能，使其成為蛋白組學復雜樣本深入分析的利器。我們通過實際樣品分析，單針進樣可以鑒定超過280種HCP。為了解決分析通量的問題，布魯克推出了兩套分析方案，一套方案是基于nanoElute的深度分析方案，2小時的LCMS分析可以鑒定超過280種HCP，通過此方案可以鑒定到盡可能多的HCP，另一套方案是基于EvoSep的快速篩查方案，20分鐘的LCMS分析可以鑒定接近60種HCP，此方案適用于工藝過程中HCP快速監測。

timsTOF Pro