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  • 發布時間:2021-04-24 17:36 原文鏈接: 常用血細胞化學染色原理和臨床意義(一)

    (1)過氧化物酶染色的原理和臨床意義

    [原理] 粒細胞和單核細胞胞漿中含有的過氧化物酶(peroxidase,POX)能將底物過氧化氫分解,產生新生態氧,它將四甲基聯苯胺氧化為聯苯胺藍。聯苯胺藍自我脫氫氧化,顯棕色四甲基苯醌二胺,再加入亞硝基鐵氰化鈉與聯苯胺藍結合,可形成穩定的藍色顆粒,定位于細胞漿內酶所在的部位。

    [臨床意義] 

    臨床上主要用于急性白血病類型的鑒別:急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞POX染色均呈陰性反應;急性粒細胞白血病 原粒細胞POX染色呈局灶分布的陽性反應;急性早幼粒細胞白血病 顆粒增多的早幼粒細胞POX染色呈強陽性反應;急性單核細胞白血病原、幼單核細胞POX染色多呈細小顆粒弱陽性反應。

    (2)過碘酸-雪夫染色的原理和臨床意義

    [原理]  過碘酸-雪夫(Pexiodic acid-schiff,PAS)染色又稱糖原染色。胞漿內存在的糖原或多糖類物質(如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等)中的乙二醇基(CHOH-CHOH)經過碘酸(Periodic acid)氧化,轉變為二醛基(CHO-CHO),與雪夫(Schiff)試劑中的無色品紅結合,形成紫紅色化合物而沉積于胞漿中糖原類物質所存在的部位。該反應稱為過碘酸-雪夫(PAS)陽性反應。

    [臨床意義]

    1)急性白血病類型的鑒別  紅白血病的幼紅細胞PAS染色多呈陽性反應,陽性率高,反應強;成熟紅細胞有時亦可為陽性;急性淋巴細胞白血病的原、幼淋巴細胞PAS染色多為紅色顆粒或塊狀陽性反應;急性粒細胞白血病的原粒細胞呈陰性或胞質呈彌漫淡色陽性反應;急性早幼粒細胞白血病 異常早幼粒細胞的PAS染色為陽性反應;急性單核細胞白血病原、幼單核細胞PAS染色陽性反應呈彌漫分布的紅色細顆粒,巨核細胞白血病原巨核細胞PAS染色呈陽性或強陽性反應,表現為紅色顆粒或塊狀。

    2)各類貧血的鑒別 MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(曾稱地中海貧血)的幼紅細胞PAS染色多為陰性反應,有時可出現陽性反應;巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。

    3)其他細胞類型的鑒別   戈謝細胞呈強陽性反應;尼曼-匹克細胞PAS染色為弱陽性,空泡中心陰性。非霍奇金淋巴細胞PAS染色呈陽性反應;R-S細胞則為弱陽性或陰性反應。骨髓內轉移的腺癌細胞PAS染色呈強陽性反應,表現為紅色顆粒或塊狀。

    (3)中性粒細胞堿性磷酸酶染色的原理和臨床意義(偶氮耦聯法,Kaplow)

    [原理]  中性粒細胞內堿性磷酸酶(neutrophile alkaline phosphatese, NAP)在pH9.2-9.8時,能水解磷酸萘酚鈉,釋放出磷酸與萘酚,再以重氮鹽與萘酚耦聯成不溶性有色沉淀于胞質內酶所存在的部位。

    [臨床意義]

    1)白血病   急性粒細胞白血病NAP陽性率及積分值均降低,急性淋巴細胞白血病NAP積分值明顯增高;慢性粒細胞白血病(無繼發感染時)NAP積分值顯著降低,甚至為“0”,類白血病反應NAP積分值明顯增高,是兩者鑒別的重要檢測項目;慢性中性粒細胞白血病NAP積分值顯著增高,常在200分/100NC以上,也有利于與慢性粒細胞白血病鑒別。

    2)其他血液病

    各類貧血  再障時NAP積分值增高,陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)和MDS時NAP積分值一般減低。因此NAP檢測有助于與PNH、MDS等疾病的鑒別。

    真性紅細胞增多癥時NAP積分值顯著增高,繼發性紅細胞增多癥NAP積分正常或降低,這是兩者的鑒別方法之一。其他慢性骨髓增生性疾病,如骨髓纖維化、原發性血小板增多癥等,NAP積分值增高。

    惡性組織細胞病時NAP積分值明顯減低,而反應性組織細胞增多時NAP積分值往往增高,有助于兩者鑒別。

    細菌性感染時NAP積分值增高,病毒感染或寄生蟲、立克次體感染時NAP積分值一般正常或降低。該檢測對鑒別細菌感染與其他感染有一定價值。

    (4)氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色的原理和臨床意義

    [原理]  細胞內的氯乙酸AS-D萘酚酯酶(naphythol AS-D chloroacetate esterase,NAS-DCE)水解基質液中的氯乙酸AS-D萘酚,產生AS-D萘酚,進而與基質液中的重氮鹽偶聯形成不溶性的有色沉淀,定位于細胞質內酶所存在的部位。本試驗常用的重氮鹽為堅牢紫醬GBC,形成的有色沉淀為紅色。NAS-DCE幾乎僅出現在粒細胞,其特異性高,因此又稱為“粒細胞酯酶”、“特異性酯酶”。

    [臨床意義]  臨床上主要用于急性白血病類型的鑒別 急性粒細胞白血病和急性早幼粒細胞白血病原粒細胞NAS-DCE染色多呈(+)-(++),白血病性早幼粒細胞呈(++)-(+++);急性單核細胞白血病 原、幼單核細胞多呈陰性反應;急性淋巴細胞白血病 原、幼淋巴細胞呈陰性反應。


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