電化學發光（ECL）是電場參與化學發光所產生的結果，是指通過施加一定的電壓進行電化學反應：體系中電極表面的三丙胺TPA釋放電子，進而釋放質子成為自由基TPA＊，同時，二價的三聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2+ 釋放電子成為三價的三聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+。
具有強氧化性的三價的三聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 和具有強還原性的三丙胺自由基 TPA＊發生氧化還原反應，結果使三價的三聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 還原成激發態的二價的三聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2+，激發態 [Ru(bpy)3]2+衰變并以釋放出波長為 620nm 光子的方式釋放能量，而成為基態的 [Ru(bpy)3]2+。
上述化學發光過程后，反應體系中仍存在二價的三聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+ 和三丙胺TPA，使得電極表面的電化學反應過程可以繼續進行。這樣，整個反應過程可以不斷循環，測定信號不斷放大，從而使檢測靈敏度大大提高，所以 ECL 測定具有高靈敏的特點。
是將磁性分離技術、化學發光技術、免疫分析技術三者結合起來的一種新興分析方法，該技術充分利用了磁性分離技術的快速易自動化性，化學發光技術的高靈敏度性，以及免疫分析的特異性，在生物分析領域展現了不可替代的作用。 目前，磁微粒化學分析免疫分析已經應用于管式化學發光免疫檢測項目以及電化學發光免疫檢測項目。
間接法 間接法就是包被抗原，然后用酶標記的抗抗體檢測樣本中抗體，適合于檢測對象是自身抗體的情況。 優點：相對較方便，只要變換包被抗原就可以檢測不同的項目。 缺點：標本中的特異性抗體會競爭性的結合抗原，使結果出現假陰性。
捕獲法 血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，后者會干擾IgM抗體的測定，因此測定IgM抗體多用捕獲法。 原理如下圖，先將所有血清IgM（包括異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，去除IgG后測定特異性IgM。
固相抗原競爭法 指受檢抗體和酶標抗體競爭性的與磁珠表面抗原結合。固相抗原競爭法基本原理如下圖所示。結合于固相載體的酶標抗體與受檢抗體的量呈反比。 若受檢樣本中無抗體，酶標抗體能夠順利與抗原結合，出現強信號。若受檢樣本中有抗體，則競爭性的占去了酶標抗體與抗原的結合，酶標抗體的結合力減弱，信號強度減弱。
雙抗夾心法（兩步法） 雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法，基本原理如下圖所示。 雙抗夾心法（一步法） 在一步法測定中，應注意鉤狀效應（hook effect），類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成夾心復合物，所得結果將低于實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果（如圖， 雙抗夾心法及雙位點一步法。缺點：假陰性）
