在許多細胞內蛋白表達、純化及蛋白-蛋白互作等免疫實驗（如WB、IP、Co-IP、ChIP）中，細胞裂解是關鍵一步。
圖片源自于網絡
根據不同細胞類型、蛋白定位及下游應用，需要不同的細胞裂解液進行細胞裂解及蛋白提取（表1）。
表1 根據不同蛋白定位選擇裂解液
| 蛋白定位 | 裂解液 |
|---|---|
| 全細胞 | NP-40、RIPA |
| 細胞質（可溶性蛋白） | Tris-HCl |
| 細胞質（細胞骨架等不溶性蛋白） | Tris-Triton |
| 細胞膜 | NP-40、RIPA |
| 細胞核 | RIPA |
| 線粒體 | RIPA |
RIPA裂解液
RIPA裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解液，獲得的蛋白樣品可用于常規WB、IP等實驗。
組分：25 mM Tris-HCl, pH 7.6、150 mM NaCl、1% NP-40、1%去氧膽酸鈉、0.1%十二烷基硫酸鈉（SDS）。
IP裂解液
IP裂解液是一種改良后的RIPA裂解液，具中等強度效力，可高效溶解細胞蛋白，但不會像RIPA一樣釋放染色體組DNA或破壞蛋白復合物。適合下游免疫沉淀或親和吸附應用。
組分：25 mM Tris-HCl, pH 7.4、150 mM NaCl、1% NP-40、1% mM EDTA、5% 甘油。
NP-40裂解液
NP-40裂解液是一種很溫和的非離子型去垢劑，與蛋白結合力強，尤其適用于膜蛋白非變性條件下的溶解。
組分：50mM Tris-HCl pH 8.0、150mM氯化鈉、1％NP-40；加蛋白酶抑制劑：抑肽酶、亮肽素、胃抑素，每種1μg / ml；使用前立即添加1mM PMSF。
Tris-Triton裂解液
Tris-Triton裂解液是非離子型表面活性劑，效力介于NP-40和SDS之間，下游應用有WB、ELISA、IP。
組分：10mM 三羥甲基氨基甲烷(Tris)，pH值7.4、100mM NaCl、1mM EDTA、1mM EGTA、1% Triton X-100、10% 甘油、0.1% SDS、0.5% 去氧膽酸鈉。
相關產品
| 品名 | CAS | 貨號 |
|---|---|---|
|
Sodium chloride, 99.5%, reagent grade 氯化鈉，試劑級 |
7647-14-5 | 105864 |
|
4-Nonylphenyl-polyethylene glycol (NP-40) 4-壬基苯基-聚乙二醇 |
9016-45-9 | 931454 |
|
Triton X-100, for bio 曲拉通 X-100，用于生化 |
9002-93-1 | 905959 |
|
Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride (Tris HCl), 99%, for bio 三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽，用于生化 |
1185-53-1 | 165488 |
|
Sodium deoxycholate, 97%, for bio 去氧膽酸鈉，用于生化 |
302-95-4 | 927090 |
|
Sodium dodecyl sulfate (SDS), 99%, for biochemistry 十二烷基硫酸鈉，用于生物化學 |
151-21-3 | 105893 |
|
Tris(hydroxymethyl)aminomethane (Tris), 99.5%, extra pure 三(羥甲基)氨基甲烷，特純 |
77-86-1 | 226162 |
|
Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), 99%, reagent grade 乙二胺四乙酸，試劑級 |
60-00-4 | 932641 |
|
Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetraacetic acid (EGTA), 99% 乙二醇-雙(2-氨基乙基醚)-N,N,N’,N’-四乙酸 |
67-42-5 | 136111 |
|
Glycerol, 99%, for bio 甘油，用于生化 |
56-81-5 | 921371 |