探討抗MHCⅡ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細胞表面MHCⅡ類分子的表達.
M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性單位,設計并克隆針對CⅡTA第3408位點的M1-RNA(M1-3408-GS)及其相應的CⅡTA靶基因片段(3176-3560),分別插入pUC19、pGEM-7zf(+)載體,進行細胞外切割活性篩選.將細胞外切割作用明顯的M1-3408-GS亞克隆入psNAV載體并穩定轉染Jurkat細胞株,采用流式細胞術檢測該細胞表面經典的MHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)類抗原表達,RT-PCR檢測其CⅡTA的mRNA水平.
結果表明:在重組人干擾素(IFN)-γ誘導下,M1-3408-GS陽性Jurkat細胞株與對照組比較,其表面HLA-DR、HLA-DP、HLA-DQ抗原誘導型表達分別降低了83.17﹪、94.12﹪及84.31﹪;同時CⅡTA的mRNA含量明顯降低(P≤0.05,t=4.89).結論:抗CⅡTA的M1-RNA(M1-3408-GS)降低了自身mRNA含量,從而阻止其調控的MHCⅡ類分子的表達.