主要用于檢測樣品中極微量的短肽激素和某些藥物等小分子半抗原。酶標志物具有更好的穩定性，且無放射性污染。
1.平衡法：將待測樣品抗原、酶標抗原及特異性抗體進行一次性溫育，待反應達平衡后，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。
2.非平衡法：先將樣品（或標準品）與抗體混合反應達平衡，然后加入酶標記抗原繼續溫育一段時間，測定離心沉淀物（酶標抗原抗體復合物）中加入酶底物液后的呈色吸光度值。
