當生化分析儀的反應底物耗盡，檢驗結果將會......

當人體肝臟、心臟等器官損傷特別嚴重時，ALT、AST、CK等酶類會大量釋放，使其在外周血中的濃度大幅升高，此時的酶活性遠遠超過試劑盒的線性范圍，極易出現參與反應的底物迅速消耗殆盡，使反應不再為零級，導致被測物報告濃度遠遠低于實際濃度。

BS-2000M2全自動生化檢測系統（簡稱BS-2000M2）是深圳邁瑞醫療生物電子股份有限公司自主研發的模塊化生化檢測系統。在封閉項目參數設置中，BS-2000M2提供了底物耗盡報警參數（即底物耗盡限）。當儀器判斷反應發生底物耗盡時，會啟動酶線性擴展功能，利用反應時間內或延遲時間內測光點來計算△A/min和結果。

本研究通過對臨床常見生化檢測項目ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CKMB、α-AMY和尿素高濃度樣本的檢測，初步評估BS-2000M2酶線性擴展功能的臨床實際應用效果。

1、樣本來源

收集復旦大學附屬中山醫院徐匯醫院門診及住院患者檢測后剩余血清，篩選出ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CKMB、α-AMY、尿素的高濃度樣本，濃度需覆蓋各項目試劑盒的線性范圍、線性范圍上限附近及線性范圍上限以上，共收集到63例樣本，所有樣本均無肉眼可見溶血及脂血。

2、儀器及試劑

BS-2000M2及配套ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CK-MB、α-AMY和尿素試劑盒、校準品和質控品均購自深圳邁瑞醫療生物電子股份有限公司。

3、方法

按照廠商推薦方法進行儀器校準與維護，所有檢測項目均在有效校準期內，質控在控。

BS-2000M2酶線性擴展功能的基本原理當反應結束，計算結果時，儀器會通過底物耗盡限查找反應區間內的線性區間。若測定結果高于線性范圍上限會有結果標記“>”提示審核者。當延遲時間內未發生底物耗盡的測光點為1或0時，無法計算結果，給出無計算區間“ENC”標記。此時需選擇減量參數（稀釋法）進行重測或啟動儀器自動重測功能。

4、討論

生化分析儀的臨床性能受儀器、試劑、儀器和試劑的集成參數、廠家溯源體系、實驗室日常校準操作和維護力度等多方面因素的影響。實驗室在選擇生化分析儀時，應特別關注動力學法檢測項目底物耗盡限。

本研究對BS-2000M2的線性擴展功能進行了驗證，結果顯示十個測試項目的可報告范圍上限分別擴展至3339 U/L、7411 U/L、3407 U/L、3945 U/L、7646 U/L、9783 U/L、14106 U/L、3296 U/L、9700 U/L和54 mmol/L。當各項目低于以上濃度時，酶線性擴展功能的檢測結果與稀釋法檢測結果的相對偏差均為臨床可接受。手工計算是否發生底物耗盡與實際反應曲線或儀器結果標記一致，未出現誤報或漏報底物耗盡現象。

封閉檢測系統的生產廠商會主動構建測量溯源體系、驗證檢測項目基本性能和優化集成參數，以保證各項目性能（如精密度、線性范圍、可報告范圍、抗干擾、準確性、交叉污染、底物耗盡能力、抗Hook效應的能力等）滿足分析質量指標的要求。然而，國內有很多實驗室使用的是自建檢測系統，因此應注意儀器空白時間和反應時間的設置、校準算法的選擇和各檢測項目溯源性的建立。

綜上所述，BS-2000M2的酶線性擴展功能大大延伸了可報告范圍，有效解決了高濃度樣本假陰性結果的風險，降低了重測頻率，縮短了樣本周轉時間。