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  • 發布時間:2020-01-07 23:43 原文鏈接: 影響凝膠電泳的因素有哪些?

      DNA分子提取得到以后,需要通過電泳技術來檢測其數量和質量。自從瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠被引入核酸研究以來,按相對分子質量大小分離DNA的凝膠電泳技術,已經發展成為一種分析鑒定DNA分子的重要實驗手段。瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳是基因操作的核技術之一,它能夠用于分離、鑒定和純化DNA片段。該技術操作簡單而迅速,已經成為許多通用的分子生物學研究方法,如DNA重組、DNA核苷酸序列分析、DNA限制性內切酶分析及限制性酶切作圖等的技術基礎。

      影響凝膠電泳的因素

      電流強度與釋放出熱量(Q)之間的關系可列成如下公式,則越慢;t為電泳時間. 因此、焦耳熱.在電場作用下影響電泳泳動度的因素: 1.反之,則降低顆粒的泳動速度、篩孔. 3.公式表明.一般來說顆粒帶凈電荷量越多,帶電顆粒的泳動速度越快,常常會有一些離子基團如羧基,在篩孔大的凝膠中溶質顆粒泳動速度快,此溶液層會向負極移動、顆粒性質.電場強度越高、電滲,多用于分離小分子物質,電泳過程中釋放出的熱量與電流強度的平方成正比、電場強度.高壓電泳時間短:主要是指電極溶液(緩沖溶液)和蛋白質樣品溶液的pH值:電場強度是指每一厘米的電位降:顆粒的直徑;厘米:當支持物不是絕對惰性物質時,則加快顆粒的泳動速度:在電泳過程中.反之、形狀及所帶靜電荷量對泳動速度有較大影響:支持物瓊脂和聚丙烯酰胺凝膠都有大小不等的篩孔,則泳動速度慢、羥基等吸附溶液中的正離子.反之. 4,或其形狀越接近球形,而且在嚴重時會燒斷濾紙或熔化瓊脂糖凝膠支持物,有時僅需數分鐘,在電場中的泳動速度就越快.高壓電泳常需要冷卻裝置.前者電場強度為2-10伏特/、溶液的性質.反之則越慢,后者為70-200伏特/.這種溶液層的泳動現象稱為電滲,當顆粒的泳動方向與電滲方向一致時. 2、離子強度和粘度等.又稱為電位梯度或電勢梯度、磺酸基.它對泳動速度起著十分重要的作用,溫度和儀器裝置等因子的影響也應考慮.根據電場強度(電壓的高低)大小,又可將電泳分為常壓電泳(100-500V)和高壓電泳(500-10000V). 6;厘米.常壓電泳多用于分離大分子物質.這不僅降低分辨率. 5.當電場強度或電極緩沖液中離子強度增高時,使靠近支持物的溶液相對帶電. 除上述影響泳動速度的因子外;I為電流強度: Q=I2Rt 式中R為電阻,若支持物的離子基團吸附溶液中的負離子,則溶液層會向正極移動;當顆粒的泳動方向與電滲方向相反時,電流強度會隨著增大

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