影響正相硅膠反相洗脫色譜儀保留值的因素：
一、色譜流動相保持一定的PH值和離子強度。隨著流動相中水的比例增加，洗脫能力減小。
二、流動相中三乙胺濃度升高，對含堿性基團組分的洗脫能力提高，保留時間縮短。三乙胺為陰離子競爭離子，用于競爭硅羥基，以消除硅羥基對生物間的吸附。
三、堿性組分的保留隨緩沖鹽濃度的增加（離子強度增加）而減少，與離子交換色譜類似。
四、PH值對色譜保留具有兩面性。隨著PH值的增加，堿性藥物的保留先增加后減小。
在實際操作中流動相的PH = 6～7為宜。PH值太低，硅羥基失去離子交換能力。PH值太高，弱堿性藥物不易離子化，硅膠在堿性溶液中有一定的溶解度。
五、由于硅氧烷基的疏水特性，非解離型物質的出峰順序與反相液相色譜類似。
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