微生物實驗室日常工作規范！

一、微生物檢測意識

樹立正確的無菌觀念和檢測人員的素質，是每一個微生物檢測人員應具備的素質，好的修養素質和積極的工作態度是保證結果準確的基礎，下面的規定規范都是為檢測服務的，如果檢測人員沒有好的素質，這些規定都是虛設，擺設；希望下面的規范是每位檢測人員想要做得，而不是強加在自己身上的緊箍咒。

①增強自己得生物安全意識，如何保護自己，如何保護樣品，如何無菌操作，有責任心。

②實驗原理，實驗原理是實驗的精髓，掌握它，就能夠對整個實驗更好的了解深入，學習研究。

③實驗條件的把握，對實驗的每個條件是否掌握清楚，實驗的關鍵控制點是否清楚。

④實驗結果的把握，一個實驗結果的出現，首先應該自我分析，并且具備這種分析能力，對異常如何處理或是進一步驗證。

⑤具備研究好學心態，檢測工作是一個相對只是含量較高的職業，高科技飛速發展的今天，許多當時的先進技術不久就陳舊落后，檢測工作也一樣，優秀的化驗員總是虛心好學，善于研究，總是處在科技的前沿。

⑥人員素質，積極向上，樂于助人，對工作負責，工作第一等，努力提高自己的工作質量。

二、微生物檢測

1.實驗前的準備

1.1無菌間

無菌間是微生物實驗的重要環節，關系到實驗結果的準確性，無菌間的使用規范要嚴格要求，保證實驗環境影響因素降到最低。

使用要求：

1、無菌間在使用前，必須先進行清理、臭氧殺菌時間50min或紫外燈殺菌30min。

2、檢測使用的器皿、樣品等物品的進出，通過緩沖窗進行傳遞，使用完畢后紫外燈殺菌30min，開傳遞窗時禁止兩邊同時打開。

3、檢測人員進入緩沖間后，先更換拖鞋、佩帶無菌帽和一次性口罩，更換衣服，并將其擺放整齊，方可進入無菌間。

4、進入無菌室過程中，依次打開和關閉各緩沖間的門，以避免空氣流通帶入外界的雜菌。

5、無菌操作前必須使用75%酒精對手部進行消毒，接種有害菌種時必須戴手套。

6、進行接種所用的吸管，平皿及培養基等必須經嚴格消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應高壓滅菌或用95%酒精點燃燒灼后使用，剪刀、鑷子至少每周進行一次高壓滅菌。

7、從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時，吸管尖不得觸及試管或平皿邊。

8、接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作，接種細菌或樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。

9、接種環或針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲，必要時還要燒到環和針與桿的連接處，接種結核菌和烈性菌的接種環應在沸水中煮沸5min，再經火焰燒灼。

10、吸管吸取菌液或樣品時，應用相應的橡皮頭吸取，不得直接用口吸。

11、檢驗結束后，所有帶菌的培養基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快清理出無菌間滅菌洗刷。

12、檢驗結束后，人員離開無菌間前，須將無菌間的衛生徹底清理、并用紫外燈進行殺菌。

13、無菌間所用工器具（剪刀、鑷子、膠頭、涂抹棒、托盤盒等）使用完畢后，擺放整齊。

14、滅菌后的無菌間懸掛“已滅菌”標識，正在使用的無菌間要懸掛“使用中”標識。防止檢測人員在未經過滅菌的無菌間中進行微生物檢測。

其它注意事項：

1.  禁止在無菌間內打手機，由于業務需要可在緩沖間內打手機。

2.  實驗過程中穿著整齊，不要出現露頭發、鼻孔等現象，禁止在無菌間打鬧、喧嘩。

3.  實驗過程中，物品要擺放整齊，實驗產生的垃圾要單獨存放不要亂放，防止污染實驗樣品。

4.  紫外燈每周五打掃衛生時要用酒精棉球擦拭，防止灰塵阻擋影響殺菌效果。

1.2實驗器具

實驗器具是微生物實驗的一個關鍵控制點，實驗器具的無菌是保證實驗結果準確的重要因素。

①培養皿，首先應確認是否經過消毒，確認后進行外觀檢查，觀察是否有破損，有破損處廢棄。滅過菌的平皿最多保存一周時間。打開的平皿整齊的擺放到實驗臺上備用，發現有破裂的平皿應廢棄；使用時看是否有平皿內部存有雜質、培養基等異物也應立即廢棄。

②玻璃器皿，新購置玻璃器具因含有游離堿，應在清潔液或2%鹽酸內浸泡24小時，再用蒸餾水清洗。檢驗沾染的油跡、污濁物等器具可用10%NaOH浸泡1小時后，用清水沖洗干凈。每周洗刷盛生理鹽水的三角瓶子，防止水垢太厚影響滅菌和微生物生長。

③實驗完畢后，使用的實驗器具應立即清洗消毒，防止微生物增長污染或者傷害到人員。所有衛生用具如拖把、掃帚、抹布、垃圾桶等都要根據污染區、清潔區、無菌區要求嚴格區分開、并專用，不得相互混淆，衛生用具每周定量用1：20次氯酸鈉液消毒浸泡、清洗、涼干，以免污染。

④在進行各種檢驗時，應避免污染；遇有場地、工作服等污染時，應立即處理，防止細菌擴散以免造成污染。凡吸過菌液的吸管或滴管或染菌的培養皿，應立即放入盛有消毒液的容器內或高壓滅菌處理。工作人員必須每天堅持做好環境衛生工作，防止灰塵飛揚，定期對整個操作環境進行消毒。

1.3藥品的使用

微生物藥品是微生物實驗的一個關鍵控制點，培養基質量的關系到檢測結果準確的重要因素。

①藥品的采購，實驗藥品缺少時，由藥品管理員上計劃。微生物藥品常規藥品按“箱”進行計算，不常用藥品按“瓶”進行計算，生化鑒定管按“支”進行計算，每種保留至少1個單位庫存量。

②藥品取用，藥品取用時到藥品管理員取鑰匙，取用后將藥品柜鎖死，并將鑰匙歸還給藥品管理員。取用人員發現藥品低于1個單位庫量時，及時通知藥品管理員。