微生物鑒定和藥敏分析儀器是用于鑒定各種病原菌, 主要是革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、腸球菌屬及真菌等,可以同時做抗菌藥物敏感性試驗,以幫助臨床醫生作出正確的病原學診斷并制定治療方法。
全自動微生物鑒定和藥敏分析類儀器結合自動化、微機化和先進的微生物檢驗方法,可同時做細菌鑒定和藥敏試驗, 能夠對臨床大多數細菌進行快速鑒定和藥敏實驗。
細菌鑒定原理:采用傳統的比色法和快速熒光法。根據不同類別細菌的理化性質不同,設計不同的測試卡, 每一張卡包括多項生化反應。儀器采用光電比色法測定細菌因分解底物導致PH值改變或由于細菌生長利用底物而引起的透光度變化;其熒光法是在測試卡的小孔中加入酶底物, 使其與細菌產生的酶結合生成熒光物質。儀器在較短的時間內能夠分析細菌對不同生化底物所產生的發熒光的物質,通過讀數器測定熒光強度來判定細菌胞外酶; 采用熒光技術鑒定細菌, 速度可以提高4- 8倍。兩小時可提供鑒定報告。細菌鑒定實驗底物有幾種不同類型,各個不同品牌的儀器均使用自己的測試卡和相應的試劑;以酶為基礎的反應底物,包括顯色底物和熒光底物;以微生物生長為基礎的底物是糖類底物和化合物底物,還有混合底物;通過與各種細菌發生氧化、降解及水解反應,產生顏色的變化或產生熒光物質,利用顯色和熒光強度的變化。來鑒定細菌的菌型。儀器會自動選擇底物進行分析。
藥敏試驗也有兩種測定法: 比濁法和熒光測定法。根據藥敏試驗的判讀標準, 每一種藥物設計了多個稀釋梯度,每一種抗生素測定最低抑菌濃度可用3- 8個測試孔不等,在卡中加入一定濃度的菌懸液;系統配有專用光電比濁儀, 便于測定由不同細菌配置菌懸液的濃度。
由于孔內微生物生長會形成小顆粒或聚集成團塊將引起濁度變化,儀器采用光電比濁法測定各個測試孔的濁度變化,每隔一定時間讀取數據一次,讀數器會測得不同的吸光度值,得以獲取待檢菌在不同濃度藥液及不同藥物中的生長率。最低抑菌濃度值(MIC) 的測定是在含有各種濃度的抗生素的反應卡中加入待測細菌的菌懸液,經過一定時間孵育后,用光電比濁法測定其透光率,獲取吸光度值,若細菌生長,濁度增加,吸光度值增大,表示該孔內的抗生素不能抑制細菌,反之表示細菌被抑制,以最小藥物濃度仍然能夠抑制細菌的反應孔為該種抗生素對此菌的MIC值。用熒光技術測定時在肉湯中加入熒光底物,大部分菌種都能在5小時內判讀MIC值,并根據相應標準報告其藥物敏感結果( S、I、R) 。MIC卡每種藥物均有多個稀釋度。儀器在每一次讀取數值后,自動將所測取的數據與存儲在硬盤中的菌種資料庫標準菌生物模型相比較,由電腦分析得出的結果做出鑒定,可通過打印機打印報告。