1.原理:其原理是將對細胞無害的顆粒-微載體加入到培養容器的培養液中,作為載體,使細胞在微載體表面附著生長,同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。
貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖,要經歷黏附貼壁、生長和擴展成單層三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖,故細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展和生長的關鍵。黏附主要是靠靜電引力和范德華力。細胞能否在微載體表面黏附,主要取決于細胞與微載體的接觸概率和相融性。
2. 攪拌轉速:由于動物細胞無細胞壁,對剪切力敏感,因而無法靠提高攪拌轉速來增加接觸概率。通常的操作方式是:在貼壁期采用低攪拌轉速,時攪時停;數小時后,待細胞附著于微載體表面時,維持設定的低轉速,進入培養階段。微載體培養的攪拌非常慢,最大速度75r/min。
3.細胞與微載體的相融性,是與微載體表面理化性質有關。一般細胞在進入生理PH值時,表面帶負電荷。若微載體帶正電荷,則利用靜電引力可加快細胞貼壁速度。若微載體帶負電荷,因靜電斥力使細胞難于黏附貼壁,但培養液中溶有或微載體表面吸附著二價陽離子作為媒介時,則帶負電荷的細胞也能貼附。