微量制備毛細管電泳實驗——單次分離

多肽：ACTH 4-10

4:1（V／V）0.5 mol／L 磷酸鈉緩沖液（pH 2.50）／乙烯乙二醇0.1 mol／L 氫氧化鈉

150 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶

1. 制備多肽混合物和預處理柱子（見多次分離步驟 1 和 2）。

2. 在 0.5 lb/in²，10 s 內用低壓注射上樣 0.1 μl 多肽混合物。

3. 使用以下條件分離多肽混合物：

電解質：0.05 mol/L 磷酸鈉緩沖液，pH 2.30

探測波長：200 nm

溫度：25℃

電壓：7.5 kV

分部大小：每收集管 3 min

4. 用一系列的含 10 μl 4:1（V/V）0.5 mol/L 磷酸鈉緩沖液/乙烯乙二醇的微量錐形瓶替換標準的出口池（正極）。收集 3 min 的流分于每一個瓶子用于分析分離的長度。

5. 用分析分離方法（見解析多肽分離實驗）篩選含多肽的流分。

對于單收集方法，CE儀器必須能有效地控制在高電壓水平時的毛細管溫度，因為高電壓水平是電泳所必需的。鼓風式冷卻通常不適合該目的。