1. 染色：鐵蘇木精
2. 肉眼觀察：
標本為心壁的一部分。
3. 低倍鏡觀察：
由于心肌纖維排列方向不一致，有縱、橫、斜等切面，故要全面觀察標本，熟悉各種切面的部位。心肌纖維呈不規則短圓柱狀，有分枝且互相吻合成網為縱切面，呈圓形或循圓形的小塊為橫切面。
4. 高倍鏡觀察：
選擇形態典型的心肌纖維縱切面觀察，注意與骨骼肌相區別。
縱切面：心肌纖維較骨骼肌纖維細而短，分枝吻合成網。細胞核，位于肌纖維的中央。較大，有時可見雙核。有暗帶和明帶構成的橫紋。但不如骨骼肌明顯。橫過肌纖維在心肌纖維首尾連接處，可見與橫紋平行著深紅色的直線或階梯狀線為閏盤。
橫切面：心肌纖維呈圓形或不規則，大小相似。肌原纖維呈點狀，著紅色，分布在肌細胞的周邊。細胞核位于肌纖維中央，呈圓形，有的未見核。肌漿著色甚淺，由于肌漿在核的兩端較多，故在末切到核酌細胞中央往往可見淺染區。