(四)抗心肌缺氧缺血藥
腦垂體后葉素能使冠狀動脈痙攣,造成急性心肌供血不足;加以外周阻力增加,導致心臟負荷加重,在心電圖上可見到心肌缺血變化。藥物若能防治這種心肌缺血變化,被認為可能有抗心肌缺血的價值。此法記錄的心電圖具有心肌缺血的特異性。常選用家兔,從耳緣靜脈注射腦垂體后葉素2.5μ/kg(用生理鹽水稀釋為3ml),時間30秒。由于靜脈推注引起的心肌缺血心電圖變化急劇,不便判斷藥物,可改用靜脈滴注法,即在10分鐘時恒速滴入上述量的腦垂體后葉素。因家兔心電圖變化持續時間較長,心電圖記錄持續到15~30分鐘。靜滴可持續更久。滴注后家兔心電圖可現出T波先升高緩低平、雙相、倒置,ST段抬高,心率變慢,P-R及Q-T間期延長,還偶有竇性心律失常、室性早搏、室性心動過速等心律失常變化。
異丙腎上腺素為強的β受體興奮藥,能通過加快心率增強心肌收縮力等環節增加心肌耗氧量,造成心臟負荷過重,心肌微循環障礙,連續應用可形成心肌梗塞樣變化,用心電圖和病理切片可檢測病變程序。常選用豚鼠、家兔或狗,豚鼠和狗每天皮下注射異丙腎上腺素2~8mg/kg,家兔10~16mg/kg,連續兩天。可見心電圖T波由正變負或雙相,并伴有ST段抬高;竇性心動過速,早搏或其它心律失常。豚鼠心臟病理變化有:白細胞和巨噬細胞浸潤,心肌纖維腫脹、斷裂、橫紋消失,甚至溶解,發生玻璃樣變和脂肪變性等。
結扎豚鼠、家兔、貓、狗、猴、豬等動物在左冠狀動脈前支均可引起心肌梗塞。其中選用家兔和狗最多且效果明顯。
心肺灌流是分析藥物對心臟作用的經典方法。一般用狗或貓,但用小動物有其優點,研究強心甙心可采用豚鼠;而研究心肌耐缺氧,則宜選用大白鼠。在大白鼠心肺灌流標本上,可研究心肌耐缺氧能力,還可同時分析心輸出量、血壓、心率等因素與心肌耐缺氧能力的關系。常選用雄性、體重250~300克左右大白鼠為宜。體重過小或過大,影響耐缺氧時間。大白鼠心肺灌流,最麻煩是出現肺水腫,影響心臟存活時間及實驗結果。減輕心臟前負荷可以緩和肺水腫的產生。
饒曼人等報導在白鼠對強心甙的作用雖較貓敏感性低671倍,但研究一般藥物對心臟收縮力、心輸出量、靜脈壓的影響,較狗、貓心肺制備節省大量人力、物力。采用大白鼠心肺灌流法用以研究心肌耐缺氧能力,較小白鼠在密閉容器內觀察常壓或減壓時的死亡時間,能更準確地代表心臟耐缺氧能力,而且能測定藥物對心輸出量、血壓、心率、心收縮力等功能的影響,有利于分析藥物延長耐缺氧時間的影響因素。但實驗條件、技術操作都有一定要求,動物用量及工作量也較大,作為篩選藥欠簡便,作為分析抗心絞痛藥物的作用原理,則較為合適。
強心甙生物檢定,常選用健康體重260~380克家鴿、1.5~4公斤貓、200~600克豚鼠和體重相差不超過7%的蛙作實驗。
(五)血管阻力測定
器官或局部血管恒速灌流泵法:根據血管阻力(R)與灌流壓(P)成正比,與流量(Q)成反比的原理,可以用各種流量計測定血流量,并且同步記錄動脈血壓(即灌注壓),用上述原理即可推算出血管阻力,常選用體重12公斤以上的狗作實驗,可采用內頸動脈灌流法、椎動脈灌流法、后肢血管灌流法、腎動脈灌流法等測定血管阻力。還可選用體重250克以上的大白鼠,采用后肢及腎動脈灌流法來測定血管阻力。大白鼠腹主動脈與下腔靜脈緊貼在一起,分離腹主動脈時,不要弄破下靜脈造成出血;插入腹主動脈灌流用的塑料管位置要適當,以保持后肢灌流通暢,如有扭曲,血管阻力急劇升高,造成人為誤差。塑料插近可拉成葫蘆形,以便結扎固定于腹主動脈內;為使血壓穩定,可輸注適量6%小分子右旋糖酐。大白鼠血壓和血管阻力對藥物反應敏感,且大白鼠消耗藥量少,又節約人力,最適合于篩選新藥和研究心血管藥理。但大白鼠血壓和阻力記錄有時不及狗穩定,對某些藥物反應的特異性及動物種屬的差異還有待積累資料。
藥物對血管的作用,除了在整體動物身上觀察分析其作用外,還可在離體情況下進行。其原理都是使動物的器官與身體血液循環隔斷聯系,人工地用適當的溶液(如洛氏液)從動脈近心端灌入,并以一定壓力使灌流液經組織毛細血管至靜脈流出,以維持器官的生理功能,從灌流液的流量可反應該器官的血管阻力變化情況。常選用兔耳、下肢、肝、腎、腸系膜血管灌流。帶神經離體兔耳血管灌流法用于分析舒約縮血管的作用部位。藥物注射于軀體或另一兔耳,如能增加或減少帶神經的兔耳灌流量,說明是間接作用,如藥物直接注入帶神經的兔耳上才發生反應,則是直接作用。離體兔耳血管灌流法用以觀察分析舒縮血管藥物對兔耳血管的直接作用。離體兔耳血管因無中樞控制,血管張力降低,對收縮血管藥敏感;對擴張血管藥敏感性稍低,灌流壓應根據流量酌情調節。
大白鼠離體膈肢交叉灌流法,從甲鼠的頸動脈引出血液,灌注到受血動物乙鼠的離體后肢,通過接受器和泵使灌注血回到甲鼠頸靜脈。在該制備中,利用乙離離體后肢只保留神經與其它部分聯系,故藥物只能通過神經影響后肢;而給予甲鼠的藥物,則只通過血流來影響所灌注的后肢血管;以此來觀察分析藥物是直接作用還是通過神經起作用。還可采用大白鼠離體后肢灌流法和大白鼠離體后肢自身灌流法進行實驗。大白鼠腎臟灌流實驗法可用于研究腎血管阻力等血液動力學變化及腎臟重吸收、分泌等生理生化功能。