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  • 發布時間:2021-06-23 15:03 原文鏈接: 快速核酸檢測黑科技——RPA

    面對突如其來的新冠疫情

    核酸檢測引來發展新高潮

    尤其在分子診斷領域

    傳統核酸分子檢測技術

    不斷蛻變和創新

    從未淡出我們的視野

    經歷了經典PCR、實時定量PCR

    再到現在的數字PCR

    三個階段

    這些都離不開PCR的高溫變性

    低溫退火和延伸

    離不開精準控溫的PCR儀

    今天小編給你介紹一個黑科技

    可以替代PCR的核酸檢測技術

    --重組酶聚合酶等溫擴增技術(RPA)


    什么是RPA

    RPA(Recombinase Polymerase Amplification)全稱重組酶聚合酶等溫擴增技術,被稱為可以替代PCR的核酸檢測技術。

    RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,最好反應溫度在37°C左右。


    RPA原理


    重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。


    RPA在核酸檢測中的優勢



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