近年來，高科技術在醫療領域的滲透和應用，使得血紅胞分析儀得到了迅猛的發展，血細胞分析儀由于其操作簡便、測定快捷，計數結果準確度高、精密性好，已逐漸取代傳統的手工操作方法，成為各大、中型醫院臨床實驗室的主要檢測手段。由于不同的血細胞分析儀生產廠家各自使用的測定原理和方法不盡相同，使得其測定結果及參考范圍有所差異；同時，在國內、外眾多的大、中型醫院中，同一實驗室擁有不同品牌、不同型號的血細胞分析儀已成為較普遍的現象，致使在同一實驗室內同一標本在不同儀器上分析，可能出現測定值的偏差，給評估和解釋結果以及給臨床上依賴實驗室數據動態監測帶來困難。
質控物作為“一種用于常規工作中核查分析過程或儀器準確性的物質”，對實驗室的質量控制起著非常重要的作用。不同品牌的血細胞分析儀，有不同的質控物：同一質控物，在同品牌不同型號的儀器上測定，其靶值可以有所差異。因此同一實驗室擁有不同品牌、不同型號的血細胞分析儀，需要購買不同品牌的質控物，這不僅增加了實驗室的經濟負擔，也為簡便有效地開展室內質控增加了難度。
我室擁有不同品牌、不同型號的血細胞分析儀七臺，為使測定結果準確可靠并初步建立經濟有效、切實可行的實驗室內持控體系，我們采用國際血液學標準化委員（ICSH）和NCCLS制定的標準，對SE-9500型血細胞分析儀進行了校準，并以SE-9500型為標準參考儀器，對NE-1500型、CD-1600型、KX-21型血細胞分析儀的測定結果WBC、RBC、HGB、MCV、PLT進行了為時13個月時間的比對，現將結果報告如下：
1 材料
1.1 儀器：血細胞分析儀7臺，其中SE-9500型1臺（Sysmex公司）；NE-1500型1臺（Sysmex公司）；CD-1600型2臺（Abbott公司），分別標以A、B；KX-21型3臺（Sysmex公司），分別標以Ａ、Ｂ、Ｃ；NIKON雙筒顯微(NIKON公司)；WB-A型微血量紅細胞比積儀（梅蘭電子有限公司）；UA-160A比色計（日本Shimadzu公司）；血細胞計數盤（上海玉光光學儀器廠），經校正多次重復測定CV小于1%；微量吸管（北京堿南玻璃制品廠），有水銀稱重法較正，CV小于0.5%。
1.2 試劑：血細胞分析儀用稀釋液、溶血液、清洗液均為配套試劑，其中SE-9500、NE-1500使用原裝進口配套試劑；HGB試劑采用WHO推薦的文-齊氏稀釋液；WBC計數用2%冰醋酸稀釋液。
1.3 定值全血質控物：由Sysmex公司提供的高、中、低定值全血標本，在有效期內使用，批號為13230510、13230511、13230512。
1.4 新鮮靜脈全血：采用真空采血方式收集臨床病人新鮮抗凝靜脈全血。真空管由美國BD公司提供，抗凝劑為EDTA-K3，終濃度為1.4～1.6g/L。
2 方法
2.1 SE-9500血細胞分析儀的較準：WBC-RBC嚴格按ICSH推薦的手工計數方法，HCB測定采用WHO推薦的氰化高鐵血紅蛋白法，HCT測定采用NC-CLS推薦的微量紅細胞比積法，對SE-9500血細胞分析儀進行校準。儀器經校準合格，可以使用。
2.2 SE-9500血細胞分析儀與Sysmex公司提供的定值全血質控物的比對；用高、中、低定值全血質控物在SE-9500血細胞分析儀上進行測定，每周兩次，繪制Levey-Jennings和MONICA質控圖。
2.3 SE-9500血細胞分析儀與其它6臺血細胞分析儀的比對：每天選取兩份病人新鮮全血，分別在SE-9500、NE-1500、CD-1600、KX-21血細胞分析儀上嚴格按操作說明書進行測定，每個標本重復兩次記錄HGB、RBC、MCV、WBCS發PLT結果并計算均值。實驗測定在采血后2小時內完成。
2.4 以SE-9500血細胞分析儀為參與標準儀器，SE-9500的參數測定值為正確值，按公式計算變異百率。
變異百分率%=測定值-正確值/正確值×100
采用HGB±3%、RBC±4%、MCV±4%、WBC±7%、PLT±10%控制線來確定新鮮全血質控圖控制界限，以測定日期為橫坐標，變異百分率結果為縱坐標繪聲繪色制質控圖。
3 結果
3.1 SE-9500血細胞分析儀與Sysmex公司提供的定值全血質控物的比對結果，見表1。
表1 SE-9500與高、中、低定值全血質控物比對結果
高 值
中 值
低 值
靶值 X S CV% 靶值 X S CV% 靶值 X S CV%
WBC 3.32 3.31 0.0746 2.25 8.12 8.12 0.1275 1.57 20.07 20.13 0.3859 1.92
RBC 2.36 2.40 0.0321 1.34 4.43 4.47 0.0453 1.01 5.29 5.32 0.0399 0.75
HGB 64 63.6 0.5903 0.93 134 133.8 1.097 0.82 173 172 1.2344 0.72
MCV 80.9 78.9 0.5671 0.72 87.8 85.3 0.6424 0.75 93.2 90.9 0.7519 0.83
PLT 50 46.7 2.2688 5.41 217 217.5 5.5097 2.53 512 498.4 14.03 2.82
從表1可見，SE-9500對高、中、低定值全血質控物的測定結果均值與靶值非常接近，經統計學分析，P>0.05，無顯著性差異。
3.2 SE-9500血細胞分析儀與其它6臺血細胞分析儀的比對結果
3.2.1 每天選取兩份病人新鮮全血在SE-9500、NE-1500、CD-1600、KX-21血細胞分析儀上進行重復測定，連續測定一月，共計22個工作日。SE-9500與其它6臺儀器HGB、RBC、MCV、WBC、PLT的比對結果見表2和圖1-5（圖略）
表2 SE-9500與其它6臺儀器測定結果間比較（1）
TWBC TWRBC THGB TMCV TPLT
NE-1500 0.9990 1.0000 0.9901 0.9869 0.7917
CD-1600A 0.9990 0.9999 0.9832 0.9582 0.6451
CD-1600B 0.9998 1.0000 0.9868 0.9834 0.5481
KX-21A 0.9999 1.0000 0.9890 0.9933 0.5359
KX-21B 0.9998 1.0000 0.9796 0.9781 0.6937
KX-21C 0.9999 0.9999 0.9780 0.9785 0.6751
YWBC=bX+a YRBC=bX+a YWHGB=bX+a YMCVC=bX+a YPLT=bX+a
NE-1500 Y=1.003x-0.0482 Y=1.0365x-0.1854 Y=0.9662x+3.016 Y=0.9194x+6.093 Y=1.0285x-5.3055
CD-1600A Y=0.9464+0.3254x Y=0.9502x+0.1273 Y=0.9415x+8.1138 Y=0.9628x+5.9244 Y=1.0584x-9.1781
CD-1600B Y=0.9411x+0.4256 Y=0.9479x+0.1447 Y=0.9582x+3.3145 Y=0.9895x+0.3892 Y=1.0387x+3.8442
KX-21A Y=1.0158x-0.0775 Y=1.0322x-0.2056 Y=0.9444x+6.3521 Y=0.8776x+13.03 Y=1.0202x-8.2538
KX-21B Y=0.9482x+0.3752 Y=1.0032x-0.1024 Y=0.9429x+6.221 Y=0.8736x+13.281 Y=1.0095x-5.0709
KX-21C Y=0.9751x+0.1393 Y=1.0208x-0.816 Y=0.9082x+8.2422 Y=0.9082x+8.2422 Y=0.9667x-2.0073
3.2.2
每天選取的兩份病人新鮮全血在SE-9500、NE-1500、CD-1600、KX-21血細胞分析儀上進行重復測定后，分別計算參數均值，并計算各儀器間HGB、RBC、MCV、WBC、PLT的CV值，以月為單位統計的各儀器間參數測定值CV結果見表3。
CV% WBC RBC HGB MCV PLT
7臺* 6臺# 7臺* 6臺# 7臺* 6臺# 7臺* 6臺# 7臺* 6臺#
平均值 4.11 4.24 2.01 2.07 1.69 1.77 1.94 1.89 5.83 5.94
最小值 2.35 2.35 1.49 1.55 0.99 1.02 1.65 1.45 4.39 4.23
最大值 6.34 6.59 2.99 3.08 2.74 2.13 2.13 2.39 7.57 7.78
注：7臺*為包括SE-9500在內的7臺血細胞分析儀。6臺#為除開SE-9500其它6臺血細胞分析儀。
3.3 以SE-9500血細胞分析儀為參比標準儀器，各儀器間變異百分率結果
變異百分率的計算不僅揭示了測定值與標準值的在數值上的偏差而且還表明了這種偏差的性質，即正偏差還是負偏差。但為以下計算方便，此處分析的僅僅是數值上的偏差，即將變異百分率取絕對值，計算以月為單位各儀器間變異百分率的結果，見表4。
表4 各儀器間變異百分率結果
變異百分率% WBC RBC HGB MCV PLT
平均值 3.67 1.94 1.42 2.13 5.97
最小值 2.35 1.31 0.98 1.85 4.79
最大值 4.66 3.12 1.82 2.44 7.54
4 討論
4.1 本實驗室內新鮮全血質控體系建立的關鍵因素之一是選擇和驗證參比的標準儀器。SE-9500型細胞分析經過校準且與高、中、低定值全血質控物的比對結果顯示其測定值與靶值非常接近，統計學分析無顯著性差異，因此SE-9500的測定結果是準確可靠的，可以作為室內的質控系統的參比標準儀器。定期使用同一品牌高、中、低定值全血質控物對SE-9500進行比對和進行質控，是保證其測定結果準確可靠的重要手段。
4.2 表2（1）、（2）顯示了SE-9500與其它6臺儀器測定間的比對結果，測試參數WBC、RBC、HGB和MCV的相關系均>0.9582，散點圖和回歸方程也表明SE-9500與其它各儀器間結果的符合性良好；參數PLT的相關系數略差一些（0.5359～0.7917），這可能與PLT本身受影響因素多和1h之后結果不穩定有關。
4.3 從表3、表4可知，在本系統建立后的13個月時間內，無論是包括SE-9500的6臺儀器比較，甚或是變異百分率統計值比較，各儀器間測定結果的月平均最大CV值分別為：WBC6.59、RBC3.08、HGB2.92、MCV2.39、PLT7.78，最大變異百分率分別為：WBC4.66、RBC3.12、HGB1.82、MCV2.44、PLT7.54，說明本系統設立的質控控制線標準HGB±3%、RBC±4%、MCV±4%、WBC±7%、PLT±10%并非不能達到，具有可操作性，是切實可行的。當然，表3、表4所計算的是月平均值，在實際應用時，采用以天為單位的計算來實行實時監控，因此常用超出控制線的情況發生，且日平均最大CV值或日平均最大變異百分率遠較月平均值為大，而能夠及時發現失控或失控傾向正是建立本質控系統的主要和根本目的。
4.4 建立實驗室內部新鮮全血質控系統，應利用EXCEL的強大計算功能和繪圖功能，建立完整的質控數據記錄表格和繪制Levey-Jennings和MONICA質控圖，即在錄入資料后就得到如平均值、變異百分率等統計參數并顯現在質控圖上，實行實時監控。
4.5 建立實驗室內部新鮮全血質控系統，應建立或選用適宜的質控規劃。Levey-Jennings和MONICA質控圖按其自身的質控規則分析，變異百分率質控圖參照L-J質控圖的觀察方法和原則。正常情況下，每日測定值的變異百分率應在0.00%上、下兩側波動。若質控圖中有連續5.6“點”都落在0.00%的上側或下側，說明有“定向改變”；若質控圖中有連續5～6“點”持續升高或降低，說明有“傾向改變”。在此原則基礎上，本實驗室規定；超出控制界限2倍時，應立即停止儀器的標本測定，查找原因。
4.6 加強實驗室內部質控管理是建立實驗室內質控體系的重要保障。首先應建立實驗室質控的程序性文件和新鮮全血質控的操作程序性文件，嚴格實施。其次每月定期召開質控總結會，對各參數和各儀器變異百分率超出限值的例數做出統計，對各種持控圖進行分析，寫出質控小結報告，半年和一年進行階段性總結。
4.7 建立實驗室內部新鮮全血質控體系，能夠發現偶然誤差和儀器系統偏差。我室兩臺CD-1600儀器使用多年，在本系統建立和使用的13個月中，儀器各項參數總的變異百分率超出質控控制線比例逐月增高，測試項目白細胞和血小板波動幅度大，顯示儀器狀態較難維持良好水平，目前擬對此兩儀器進行大修或淘汰。在實施過程中，曾發現KX-21A、KX-21B儀器與SE-9500儀器MCV參數相比，存在系統性偏高傾向，KX-21A經調節儀器HCT參數、KX-21B經調節RBC參數后，結果傾向性得到解決。
總之，確立實驗室內的標準參比儀器，再建立新鮮全血在多臺儀器間的質控體系在擁有多臺不同品牌、不同型號的血細胞分析儀的大、中型醫院實驗室，不失為一種簡便、經濟的質控措施。實時監控可以及時發現偶然誤差，如數據錄入錯誤、試劑更換錯誤等，定期總結分析便于發現系統誤差或系統傾向。通過本實驗室的實踐，我們認為此系統的建立和實施方案是行之有效的。
摘自《中國醫學會全國第四屆中青年檢驗醫學學術會》