核酸提取磁珠又稱為DNA提取磁珠,RNA提取磁珠,硅基磁珠,是生物磁珠的一種,其原理是采用穩定的高分子材料作為分離載體,引入磁性,再偶聯上配基,形成含有磁性粒子的高分子微球。核酸提取磁珠適用于各類生物檢材的DNA、RNA提取,目前已廣泛應用于植物、動物、全血、血清、口腔拭子、唾液、干血片、細菌、質粒、法醫樣本等檢材的核酸提取,配合全自動核酸提取儀可實現高通量的DNA自動化提取。
主要從以下幾個方面判斷其穩定性:
1、磁響應時間
磁響應時間是指核酸提取磁珠放置于磁力架后,完全磁分離的時間,磁響應時間不應過長,太長的磁響應時間會使等待時間變長,降低操作體驗。一般來講,吉恩特磁珠的磁響應時間以30秒以內為宜,其他磁珠的時間最長不能超過60秒,因此,我們在選擇核酸提取磁珠的時候,要首先測試磁珠的磁響應時間,根據實驗要求,選擇磁響應時間合適的核酸提取磁珠。
2、半沉降時間
半沉降時間一般用來表示核酸提取磁珠的懸浮性或分散性,理論上來講,半沉降時間越長,磁珠的懸浮性越好,連續加樣的穩定性就越高,按經驗來看,半沉降時間一般應在10分鐘以上,最短時間也不能低于5分鐘,否則,磁珠的沉降速度會很快,需要在加樣的時候,增加核酸提取磁珠的混勻頻率,以免由于混勻程度不夠,造成磁珠加樣量的不均一,從而使提取結果差異較大。因此,選擇半沉降時間適中的核酸提取磁珠,也會增加實驗的穩定性。
3、重懸性
重懸性是指核酸提取磁珠完全沉降后(自然沉降),再次回到完全懸浮狀態的難易程度,這項參數經常被使用者忽略,也是造成實驗結果不穩定的重要因素之一,重懸性的好吉恩特磁珠,即使完全沉降數小時,數天,數月后,稍加用力混勻即可回到完全懸浮的狀態,而有些核酸提取磁珠,沉降數分鐘后,重懸的難度就非常大,這樣的磁珠在使用時,很難保證是否處于完全懸浮的狀態,從而造成加樣量的不均一,直接影響實驗結果的穩定性。因此,核酸提取磁珠的重懸性應作為判斷穩定性的重要因素之一。
4、吸附效率的穩定性
吸附效率的穩定性是指核酸提取磁珠回收已知濃度DNA的回收效率,這個數值應該是一個絕對值,有些使用者喜歡進行吸附量的測試,而不是回收效率的測試。然而,吸附量并沒有標準的參考,是一個相對值,受樣品的新鮮程度,試劑與磁珠的兼容程度,試劑的穩定性,磁珠的穩定性等多種因素影響,也許好的試劑體系能夠容忍穩定性差的磁珠,而差的試劑體系,對于穩定性好的磁珠來講,確實有失公正,容易得出有偏見的結論。因此,回收效率的測試是判斷核酸提取磁珠穩定性的良好辦法,這里需要強調一點,回收效率并不能說明磁珠的吸附量,只能用于判斷核酸提取磁珠的穩定性。
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