怎樣用高效液相色譜儀檢測分析食品中的成分？（二）

二、系統適用性試驗

按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗，即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整,應達到規定的要求；或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度和拖尾因子。

(1)色譜柱的理論板數(n)在選定的條件下，注入供試品溶液或各品種項下規定的內標物質溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分或內標物質峰的保留時間t<[R]>（以分鐘或長度計，下同，但應取相同單位）和半高峰寬（W<[h/2]>）,按n＝5。54(t<[R]>／W<[h/2]>)<2>計算色譜柱的理論板數，如果測得理論板數低于各品種項下規定的最小理論板數，應改變色譜柱的某些條件（如柱長、載體性能、色譜柱充填的優劣等），使理論板數達到要求。

(2)分離度定量分析時，為便于準確測量，要求定量峰與其他峰或內標峰之間有較好的分離度。分離度（R）的計算公式為：2(t<[R2]>－t<[R1]>)R＝──W<[1]>＋W<[2]>式中t<[R2]>為相鄰兩峰中后一峰的保留時間；t<[R1]>為相鄰兩峰中前一峰的保留時間；W<[1]>及W<[2]>為此相鄰兩峰的峰寬。除另外有規定外，分離度應大于1.5。

(3)拖尾因子為保證測量精度，特別當采用峰高法測量時，應檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規定,或不同濃度進樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為：W<[0.05h]>T＝──────2d<[1]>式中W<[0.05h]>為0.05峰高處的峰寬；d<[1]>為峰極大至峰前沿之間的距離。除另有規定外，T應在0.95～1.05間。也可按各品種校正因子測定項下，配制相當于80％、100％和120％的對照品溶液，加入規定量的內標溶液，配成三種不同濃度的溶液，分別注樣3次,計算平均校正因子，其相對標準偏差應不大于2.0％。