4、Loading buffer（10ul每個樣）
| 總體積 | 100ul | 200 ul | 500ul |
| 10×MOPS | 10ul | 20 ul | 50ul |
| 甲醛 | 16 ul | 32 ul | 80 ul |
| 甲酰胺 | 50ul | 100 ul | 250ul |
| Dye | 20 ul | 40 ul | 100 ul |
| DEPC H2O | 4 ul | 8 ul | 20 ul |
注： 不加EB
5、樣品準備
將樣品保持在冰塊中。
5ugRNA+ 10ul loading buffer
3等份分裝 Eppendorf doff 中 （1） 檢測 （2）28s 或者Actin （3）有用的RNA
變性：65度，10分鐘，然后將樣品放到冰塊中。
Prepare letter：： 1-2ul letter+10 ul loading buffer
Loading 樣品
小心將樣品轉移到泳道中，吸管頭部不能有氣泡
電壓：90-120V，1小時。
四、Blotting （transfer）
將電泳膠剪切下來檢測RNA。
（1）檢測RNA：在膠中加入EB染色。
（2）28S和有用的RNA：
加 0.05N NaOH，20分鐘。
DEPC H2O清洗 2-3分鐘。
20×SSC 浸泡20分鐘。
準備尼龍膜3張和濾紙
轉膜：從底部開始
塑料薄膜
濾紙：大小可以蓋住20×SSC
膠： 正面向下，以便RNA可以貼著膜，在膠的周圍用電影膠片圍著。
尼龍膜：一旦用了，就不能夠移動了。
濾紙三層：與膠的大小一致。
紙巾：5-8厘米厚。
將上述物品固定后，在上面壓一塊重物，過夜（或者至少要8小時）