實驗方法原理 用加樣槍或 Pasteur 吸管吸取集落,移至培養瓶或多孔板的培養孔中。
儀器、耗材 生長培養基多孔板培養瓶解剖顯微鏡移液器粗頭筆黃色槍頭。
實驗步驟
1. 用倒置顯微鏡觀察培養皿中的細胞,用氈制粗頭筆或 Nikon 標記筆標記出集落。
2. 24 孔板的每一孔中加 1 ml 培養基。
3. 解剖顯微鏡(20~50× 放大)下挑取集落
(a)每一個細胞集落用一個槍頭(加樣槍上的黃色槍頭)。
(b)將移液器調至 100 μl。
(c)先用槍頭吸大約 50 μl 的培養基,將該槍頭對準要分離的集落,在集落內輕輕吸取剩余的 50 μl。
4. 將吸取物移至 24 孔板,用培養基沖洗集落,如果培養基中含美希索,集落就會固定、黏附,然后生長;如果培養基含有瓊脂,則需用吸管在培養孔內上下吹吸集落幾次,分散瓊脂。細胞克隆也可以直接移至豎直放置的 25 cm2 的塑料培養瓶中。
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