成都生物所發明一種檢測單核苷酸多態性的方法簡便實用

　　中國科學院成都生物研究所“一種檢測單核苷酸多態性的方法”獲國家知識產權局發明ZL（ZL號：ZL 201310045649.0）。

　　單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphism，SNP)，主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態性，是基因組DNA中某一特定核苷酸位置上發生轉換、顛換、插入或缺失等變化，它是人類可遺傳的變異中最常見的一種，占所有已知多態性的90%以上，與許多疾病直接相關，是決定人類疾病易感性和藥物反應差異的主要因素。

　　目前核酸探針技術在臨床微生物學、血液篩選、遺傳病診斷和預防、法醫學等領域得到越來越廣泛的應用，是定性或定量檢測特異RNA或DNA序列的有力工具。連接酶依賴的DNA擴增技術多用于單核苷酸多態性的檢測。目前的LCR擴增技術多與同位素標記或者熒光修飾相結合運用于單核苷酸多態性的檢測，這些方法都在一定程度上存在同位素污染、試劑或者檢測儀器成本過高等問題。

　　針對上述問題，成都生物所研究人員發明一種簡單、方便、實用、經濟，廣泛適用于各種單核苷酸多態性檢測的方法。該方法將DNAzyme探針與Gap-LCR探針相結合，通過在LCR體系中的待連接的一個磷酸化探針中加入一段DNAzyme序列，Gap-LCR擴增反應結束以后，向體系中加入Anti-G序列（與探針中的DNAzyme序列部分互補配對），利用Lambda外切酶降解5端磷酸化的DNA探針，然后利用外切酶III釋放連接產物中的DNAzyme，通過DNAzyme的特性來進行SNP的定性和定量檢測。