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  • 發布時間:2025-04-07 18:54 原文鏈接: 我們該如何選擇血清?

    在細胞培養的世界里,血清的選擇絕對是個關鍵環節。它就像是給細胞準備的“營養套餐”,直接影響細胞的生長、繁殖和健康。今天,我們就以牛源血清為例來好好聊聊,如何在眾多血清中挑出最適合的那一款。

    一、牛源血清的分類及特點

    牛源血清根據牛的年齡和采血方式,分為幾種不同類型,各有各的“特長”。

    1. 胎牛血清(FBS)

    胎牛血清是在母牛懷孕3-8個月時,通過剖腹心臟密閉穿刺取血獲得;

    胎牛血清未接觸外界環境,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少;

    胎牛血清促細胞生長因子、促附因子、激素及其他活性物質的含量與其他幾類血清有所不同;

    胎牛血清由于凝血功能差,紅細胞容易破裂,因此通常表現出微紅色或橘色;

    胎牛血清蛋白和脂類含量低,比較稀薄;

    胎牛血清價格相對其他牛血清更高一些。

    2. 新生牛血清(NCS)和小牛血清(BCS)

    這兩種血清是從新生牛或小牛身上采集的;

    它們的成分和胎牛血清有所不同,抗體等成分相對多一些;

    新生牛(小牛)血清顏色一般是蠟黃色或偏黃色,質地比胎牛血清更粘稠。

    3. 供體血清

    這是從成年牛身上采集的血清,成分和前面幾種又有差異,一般用得相對少一些。

    二、選擇血清的要點

    選血清可不是隨便挑一個就行,得綜合考慮好幾個方面。

    1. 血清來源

    首先,得確保血清來源可靠。

    世界動物衛生組織(OIE)對國家或地區動物感染性疾病有相關評價指標,如瘋牛病風險評價指標GBR就是根據瘋牛病風險等級進行地域性風險評估及分類。目前世界上僅有一些少數國家在OIE對牛類風險性疾病的評估中符合中國海關要求,因此中國海關允許進口的血清來源地有澳大利亞、新西蘭、烏拉圭等,這些國家來源的牛血類制品的生物安全等級較高,科研人員在使用相關來源的血類制品時極大降低了感染疾病的風險。

    2. 質量把控

    《中華人民共和國藥典》中明確規定了牛血清的定義以及一系列關鍵質量標準,包括內毒素含量、總蛋白含量、血紅蛋白水平、pH值、微生物限度、免疫球蛋白含量以及抗生素殘留等指標。

    此外,針對牛類傳染性疾病的檢測也至關重要。需要檢測的病原體包括牛呼吸道融合病毒(BRSV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、牛細小病毒(BPV)、藍舌病毒(BTV)、牛腺病毒(BAdV)、狂犬病毒(RABV)和呼吸道腸道病毒(REO)等。其中部分病原體可引發人畜共患病,若血清中病毒檢測不合格,不僅會影響實驗結果,還可能對科研人員的健康與安全構成威脅。

    因此,要選擇質控標準嚴格按照藥典要求,并遵循cGMP規范生產流程的血清供應商,可在血清生產等各個環節保證產品質量。

    3. 批間差異

    血清批間差異是不可避免的,因為血清制品來源于天然活體,供體牛的生理狀況、健康狀況均不同,且受飼養環境的地形、風貌、飲食、水源等影響,體內各類蛋白、生長因子和酶類的含量均有巨大差異,所以血清具有含量復雜且不固定的特性。因此批間差異小的血清不僅可以保證血清質量,確保細胞培養效果,還能減少由于批間差異帶來的使用前測試,避免實驗結果的不可重復性。

    而相同品牌的胎牛血清,在蛋白質含量等方面,也可能會存在批次差異,因此在同一實驗中最好使用來自同一批次的血清,以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,請進行驗證實驗以確保結果的可重復性。

    三、根據細胞類型選擇血清

    不同的細胞對血清的需求不同。比如干細胞、淋巴細胞和神經細胞等,必須使用胎牛血清。而腫瘤細胞等則可以使用小牛血清。此外,不同類型血清的使用濃度也有所不同,通常在10%-15%之間,特殊情況下可能達到20%。

    血清是細胞培養中的重要“伙伴”,選對血清能大大提高細胞培養的成功率。要綜合考慮血清的來源、質量、批間差異以及細胞類型等因素。雖然胎牛血清在很多方面表現優秀,但也要根據實驗需求和預算來選擇最適合的血清。如果不確定哪種血清最適合,可以進行小規模的篩選試驗,找到最適合的那款。總之,用心挑選血清,讓細胞在培養過程中“吃好喝好”,才能更好地為我們的研究服務。

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