所有色譜峰均展寬的可能原因及解決方法

一、樣品量過載

稀釋樣品或減少進樣體積使色譜柱恢復平衡。注意：使用強度較弱（相對于流動相而言）的樣品溶劑，進樣體積可以達到色譜柱死體積的10%左右；而使用強度較強的溶劑，進樣體積可能高僅為柱死體積的1%。

二、室溫變化過大

需要使用色譜柱恒溫箱，以保證色譜柱溫度恒定。

三、系統沒有達到平衡

請保證色譜柱、檢測器等有足夠的時間平衡。如果是梯度洗脫，兩次進樣間保證足夠的時間使系統重新達到平衡。色譜柱次使用離子對試劑時，要有充足體積的流動相和足夠的沖洗時間確保色譜柱充分平衡。

四、色譜柱問題

若色譜柱問題可能會導致多種譜圖異常情況。色譜柱被污染，如果是因為色譜柱被污染導致了問題的出現，則應按照相關方法沖洗色譜柱，如果這樣做仍不能使問題得到解決，則需更換色譜柱；色譜柱柱效下降，如懷疑因色譜柱柱效降低導致，則要用一支柱效好的色譜柱更換當前色譜柱，然后用一系列標準樣品進行測試，比較保留時間的重復性，如果保留時間是重復的，則表明原來的色譜柱柱效已經下降，需更換色譜柱，如果保留時間不穩定，則問題可能出在流動相混合不均勻、溶劑或保護柱、在線過濾器被污染等；如果系統中使用了保護柱，在測試柱效時應將其卸下，保護柱也可能是污染源，所以在更換色譜柱的時候有必要將保護柱一同更換。

五、色譜柱選擇不當

檢查使用的色譜柱內徑和填料是否正確。

六、保護柱問題

更換被污染的或者柱效下降的保護柱后再測試色譜柱的柱效，正常情況下柱效應該是上升的。如果不是，應按照前面討論的方法檢查色譜柱是否被污染或柱效是否下降。

迅速診斷提示：所有的色譜峰都展寬通常是由于儀器或色譜柱選擇不當而造成的。一般要先檢查色譜柱和保護柱，因為它們是系統的核心組成部分，需要重點排查。