ImageJ(https://imagej.nih.gov/ij/ )是美國NIH基于Java開發的免費圖像處理軟件。今天的主題是共定位分析,那么什么是共定位(Colocalization)?從物理角度來看,它意味著兩種或多種顏色熒光分子發出的顏色占據圖像中的相同像素。在生物學上,共定位是指兩個或多個不同分子位于細胞中的同一結構。
在數字成像的背景下,它可以被描述為多通道圖像中的兩種或更多熒光染料在空間重疊。共定位對于確定感興趣結構的位置必不可少,當我們發現某一蛋白在細胞中其重要作用時進一步研究其在何處與何分子結合發揮作用顯得尤為重要。話不多說, 應大家要求今天給大家分享使用ImageJ分析熒光共定位。
免疫熒光熒光染料的選擇熒光避免串色,保存為tiff或者共聚焦格式圖片(如.lsm)避免圖像信息丟失。熒光圖像的背景取決于多種條件,包括顯微鏡因素以及熒光染料熒光強度等。為保證結果有可比性,所有圖片應該使用相同的條件拍攝。