間接免疫熒光法實驗原理：將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。
第一步，用未知未標記的抗體（待檢標本）加到已知抗原標本上，在濕盒中37℃保溫30min，使抗原抗體充分結合，然后洗滌，除去未結合的抗體。
第二步，加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應，標記[de]抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合，從而可鑒定未知抗體。
