□本報記者 張思瑋
“藥敏試驗需要培養時間，結果具有滯后性，再加上檢驗與臨床缺乏溝通，往往會導致藥敏試驗結果不能滿足臨床治療要求。”解放軍第一一七醫院檢驗科主任孫長貴日前在接受《科學時報》記者采訪時表示，測定細菌對抗菌藥物的敏感性，是臨床合理用藥的重要依據，而確保其結果的準確性，必須要懂得正確選擇藥敏試驗指征、藥敏試驗方法、科學合理地選擇試驗抗菌藥物及解釋標準等。
的確，隨著近年來新型抗菌藥物不斷出現和抗菌藥物的廣泛應用，逐漸導致耐藥菌株的不斷出現，尤其是抗生素濫用，造成抗藥突變菌株的大量出現。
“抗菌藥物會對病原體有一定的作用，但如果使用不當便會導致抗藥性的形成，甚至干擾機體內的正常微生物群的作用，反而對機體帶來不良影響。”孫長貴說，抗菌藥物是臨床常用的藥物，但是各種病原體對抗菌藥物的敏感性是各不相同的。
有選擇地進行藥敏試驗
藥敏試驗的目的是檢出細菌的耐藥性，確定病原細菌對哪種藥物有抗藥性，避免醫生將其作為治療用藥。
但并不是所有的細菌都需要進行藥敏試驗。“只有已知可能出現耐藥的菌株，并且屬于引起感染的致病菌，或引起免疫功能低下患者感染的條件致病菌，才需要做藥敏試驗，若屬于正常菌群的污染菌或與感染無關的細菌則無需試驗。”孫長貴說。
當然，也存在著起初對某種抗菌藥物敏感的菌株在患者開始治療后發展成為中介或耐藥。
孫長貴建議，此時就應該從身體相同部位分離出相同菌株，進行藥物敏感性試驗，來檢測是否已發展為耐藥。
“這種耐藥性可在治療后3~4天內出現，已注意到在用第三代頭孢菌素治療腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬和沙雷菌屬，以及所有抗菌藥物治療銅綠假單胞菌以及喹諾酮類治療葡萄球菌最常出現上述情況。而金黃色葡萄球菌通常在延長療程期間對萬古霉素敏感菌株可發展為對萬古霉素中介。”孫長貴說。
常規的藥敏試驗方法包括紙片擴散法、肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法和濃度梯度法（E-test），但每種方法都有優缺點和適用性。
“對于常見的需氧快速生長的一些細菌，紙片擴散法和測定MIC方法均適用；而對其他非腸桿菌科細菌，紙片擴散法則不適用，需測定MIC。”孫長貴說，進行藥敏試驗的細菌都需要執行CLSI M100-S21文件中的解釋標準，對于CLSI M100-S21文件中未包括的非常見分離菌或苛養菌抗菌藥物試驗方法，可參見CLSI 指南M45。而對于還沒有解釋標準的微生物，通常執行肉湯稀釋或瓊脂稀釋法測定MIC。
試驗抗菌藥物選擇結果評價與解釋
“選擇抗生素應該合理、科學、經濟、得當，原則上還應根據CLSI推薦的依感染菌的屬種來選擇抗生素的組別，比如A組為首選藥物、U組為只用于尿培養的試驗藥物。”
除此之外，孫長貴還提醒選擇抗生素還應該注意了解抗菌藥物的抗菌譜、某些特殊的耐藥機制、抗菌藥物的藥代動力學特點、流行病學資料、以及菌株的天然耐藥性等方面。
通常藥敏試驗的結果會提示細菌對某種抗菌藥物的敏感程度，供臨床醫生的參考。但是很多檢驗人員也會在實際的藥敏試驗過程中遇到一些“奇怪”的問題。比如銅綠假單胞菌對頭孢唑啉、氨芐西林或復方新諾明敏感；MRSA對青霉素類敏感等。
“這就需要檢驗人員細心地找出原因并加以糾正。”孫長貴說，如果檢測結果提示“非敏感”，應確證微生物鑒定和藥敏試驗結果。如果遇到耐慶大霉素的革蘭陽性球菌即使出現對阿米卡星、奈替米星敏感，也應報告耐藥；葡萄球菌、淋病奈瑟菌等β-內酰胺酶陽性，如測得青霉素類藥物敏感，應報告耐藥；耐甲氧西林葡萄球菌，應報告對所有β-內酰胺類藥物耐藥。
而對于未曾報告過、非常見表型，孫長貴建議應確認藥敏試驗結果和確認菌株鑒定。
藥敏試驗的結果出來后，接下來就是臨床醫生根據藥敏試驗的結果來選擇抗生素，對患者進行積極地治療。
“進行藥敏試驗，還必須要重視試驗中培養基種類及質量、試驗用藥物的純度和菌液的濃度、藥物的含量及孵育時間等諸多因素的影響。只有確保藥敏試驗結2011年CLSI M100-S21文件主要更新內容：
1.對某些表格和附錄進行重新命名、編號和安置，體現在19個表格。如： （1）表1.常規試驗和報告抗菌藥物分組（非苛養微生物），更改為：表1A.常規試驗和報告抗菌藥物分組（非苛養微生物）。（2）表3.紙片擴散試驗—用于監控準確性的質控菌株允許范圍（mm）；使用不加血液或其他添加劑的M-H培養基測試非苛養菌，更改為：表3A.紙片擴散：非苛養微生物質控范圍（未加添加劑的M-H培養基）。（3）附錄B.抗菌藥物敏感性試驗質量控制菌株，更改為：附錄C.抗菌藥物敏感性試驗質量控制菌株。
2.刪除了某些表格及內容。
（1）刪除表1B，潛在生物恐怖病原菌試驗和報告抗菌藥物；刪除表2I. 霍亂弧菌抑菌圈直徑和MIC解釋標準；刪除表2K.潛在生物恐怖病原菌MIC解釋標準（μg/mL）：炭疽芽胞桿菌、鼠疫耶爾森菌、鼻疽伯克霍爾德菌、假鼻疽伯克霍爾德菌、土拉熱弗朗西斯菌和布魯菌；刪除表2L.幽門螺桿菌MIC解釋標準。刪除幽門螺桿菌QC范圍和試驗條件；刪除潛在生物恐怖病原菌QC菌株的QC范圍（以前表4C和4D）。上述表格被移到CLSI文件M45。（2）警告表中刪除表2A產ESBL肺炎克雷伯菌、產酸克雷伯菌、大腸埃希菌和奇異變形桿菌列表內容，目前，修訂的頭孢菌素折點已發布。（3）刪除警告表中表2K鼠疫耶爾森菌列表內容。
3.新增內容
（1）測試厭氧菌抗菌藥物推薦分組（新）表1C。（2）厭氧菌MIC解釋標準（新）表2J。（3）增加厭氧菌質量控制范圍（瓊脂稀釋法）作為新表4D；增加厭氧菌質量控制范圍（肉湯微量稀釋法）作為新表4E。（4）固有耐藥—腸桿菌科（新）附錄B。（5）各種厭氧微生物累積抗菌藥物敏感性報告（新）附錄E。
“結果準確無誤，給臨床用藥提供可靠的治療依據，才能避免用藥不當產生耐藥菌株。”孫長貴說。