1. 將組織置于新配制的 HGUS 緩沖液中(含有 X-Gulc 及其他添加物),足以完全浸沒材料,試驗在微量滴定板或者試管中進行。
2. 吸真空 5~10 min,然后去掉真空條件。
3. 鋁箔包裹,37℃ 放置 48 h。
4. 用 100 mmol/L 的磷酸鹽緩沖液(pH 為 7.0)洗脫材料。
5. 為了清洗材料以便觀察,在 25% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 50% 的乙醇溶液中孵育 15~30 min,在 75% 的乙醇溶液中孵育 30 min。
6. 最后,在 90% 的乙醇溶液中(期間更換幾次)37℃ 孵育 2~4 h,或者直到所有的葉綠素去掉為止。
7. 樣品可以無期限地保存在 90% 的乙醇溶液中。蓋緊蓋子,避光室溫放置,但要經常監測乙醇的含量。 展開 |