拉曼光譜問答總結（一）

　　一、測試了一些樣品，得到的是Ramanshift，但是文獻是wavenumber，不知道它們之間的轉換公式是怎么樣的？激光波長632.8nm。

　　1.兩者是一回事。ramanshift即為拉曼位移或拉曼頻移，頻率的增加或減小常用波數差表示，拉曼光譜儀得到的譜圖橫坐標就是波數wavenumber，單位cm－1。

　　2.在Raman譜中，wavenumber有兩種理解，一種是相對波數，這時就等于Ramanshift；另一種是絕對波數（這在熒光光譜中用的比 較多），這個絕對波數是與激發波長有關，不同的激發波長得到的絕對波數是不一樣的，這時Ramanshift等于（10000000/激發波長減去 Raman峰的絕對波數）。所以通常在Raman譜中，wavenumber一般可理解為Ramanshift。

　　二、如何用拉曼光譜儀測透明的有機物液體，測試時放到了玻璃片上測出來的結果是玻璃的光譜。

　　1.我今天還在用激光拉曼測聚苯乙烯，沒有出現你說的情況啊是不是玻璃管被污染的厲害？

　　2.你測出的玻璃的信號，有沒有可能們焦點位臵不對？

　　3.應該是聚焦位臵不對，聚在玻璃上了，我以前也犯過同樣的錯誤。

　　4.用凹面載玻片，液體量會比較多，然后用顯微鏡聚焦好就可以了，如果液體有揮發性，最好液體上用蓋玻片，然后焦點聚焦到蓋玻片以下。如果還不行，你可以查一下“液芯光纖”這個東東

　　5.建議：

　　（1）有機液體里面的分析物質濃度多大?Raman測定的是散射光，所以在溶液中的強度相對比較底，故分析物濃度要大些。

　　（2）你用的是共聚焦Raman嗎？聚焦點要在毛細管的溶液里面才好。可以在溶液中放點“雜物”方便聚焦。

　　（3）玻璃是無定形態物質，應該Raman信號比較弱才對。

　　三、我們這里有做生物樣品的拉曼光譜的，在獲得的圖里面有很強的熒光，有的說，如果拉曼得不到就用其熒光譜。可我想問一下，在拉曼譜里面得到的熒光背景，是真正的熒光特征譜嗎？這和熒光光譜儀里面的熒光圖有什么區別？

　　1.原則上說，拉曼譜中的熒光和熒光譜中的熒光是一樣的，只要激發波長和功率密度相同。注意橫坐標要從波數變換為納米，即用 10000000nm（1cm）除以波數就行了。但有一點要注意，不同波長的激發光照射樣品，得到的拉曼相近，但熒光可以有很大不同，甚至相同波長不同功 率激發，熒光譜都大不一樣。

　　2.“注意橫坐標要從波數變換為納米，即用10000000nm（1cm）除以波數就行了”？Raman測定的是散射光，得到的是Ramanshift. Ramanshift和絕對波長（熒光光譜）之間要一個轉換的吧。

　　3.生物樣品一般熒光峰比較寬，用熒光光測試之前一般先會做儀器本身曲線校正也就是儀器本身的響應曲線，這樣測出的熒光峰才比較準，特別是對于寬峰更要做這個較準。而Raman光譜一般采集的區域比較窄（指的是波長區域），一般在窄的波長范圍變化不大，因此一般不考慮儀器本身響應曲線誤差，但是Raman光譜來測寬熒光峰，影響就比較大。

　　四、什么是共焦顯微拉曼光譜儀?

　　1.共焦拉曼指的是空間濾波的能力和控制被分析樣品的體積的能力。通常主要是利用顯微鏡系統來實現的。僅僅是增加一個顯微鏡到拉曼光譜儀上不會起到控制被測樣品體積的作用的—為達到這個目的需要一個空間濾波器。

　　2.（1）、顯微是利用了顯微鏡，可以觀測并測量微量樣品，最小1微米左右

　　   （2）、共焦是樣品在顯微鏡的焦平面上，而樣品的光譜信息被聚焦到CCD上，都是焦點，所以叫共聚焦

　　3.拉曼儀器的共焦有2種呢，一種是針孔共焦，一種是贗共焦.我覺得好像不應該稱為贗共焦，共聚焦有真正的定義說一定要針孔才是共聚焦嗎？好像沒有，頂多稱為傳統共聚焦或者針孔共聚焦、簡單共聚焦之類的。個人想法，大家指正。

　　五、請問，測固體粉末的拉曼圖譜時，對于熒光很強的物質，應該如何處理？特別是當熒光將拉曼峰湮滅時，應該怎么辦？增加照射時間的方法，我試過，連續照射了4小時，結果還是有很強的熒光。我只有一臺532nm的激光器，所以更換激光波長的方法目前我不能用。想問問各位，還有別的方法嗎？

　　1.使用SERS技術或者使用很少量的樣品進行測量，或者稀釋你的樣品到一些別的基體里面去，比如說KBr。

　　2.波長不可調的話，激光強度應該是可調的，你把激光強度調低點試試。這個在光源和軟件上都有調的。全調到比較低的，然后再用長時間試試。

　　3.可以嘗試找一種溶劑溶解粉末，看能不能猝滅熒光背景。采用反斯托克斯，濾光片用Nortch濾光片。

　　六、請問用激光拉曼儀能測量薄膜的厚度、折射率及應力嗎？它能對薄膜進行那些方面的測量呢？

　　1.應該不能測薄膜的厚度、折射率及應力吧

　　2.現在的共焦顯微拉曼可以做膜及不同層膜的，你的問題我覺得用橢偏儀更好

　　3.拉曼光譜可以測量應力，厚度好像不行

　　4.應力可以測，應力有差別的時候拉曼會有微小頻移，其他兩種沒聽說過拉曼能測

　　七、拉曼做金屬氧化物含量的下限是多少?

　　我有一幾種氧化物的混合物，其中MoO3含量只有5%，XRD檢測不到，拉曼可以嗎？

　　應該和待測樣品的拉曼活性有關，并不能絕對說一定能測到多少檢測線，有些氧化物可能純的樣品也測不出光譜，信號強的則可能會低一些

　　八、小弟是剛涉足拉曼這個領域，主打生物醫學方面。實驗中，發現溫度不同時，拉曼好像也不一樣。不知到哪位能幫忙解釋一下這個現象

　　溫度升高，拉曼線會頻移，線寬會變寬，只要物質狀態不變，特征峰不會有太大變化，除非高溫造成化學反應或者其他變化

　　九、文獻上說，拉曼的峰強與物質的濃度是成正比關系，那么比如我配置1mol/L的某溶液，和0.5mol/L的溶液，其峰強度是正好一半的關系嗎？應用拉曼，是否能采用峰積分，或者用近紅外那樣的多元統計的辦法來定量嗎？準確度怎么樣？

　　存在激發效率的問題，拉曼一直以來被認為只能做半定量的研究，就是因為不是線性的，有這方面的文獻，具體記不清了。

　　十、拉曼峰1640對應的是什么東西啊？無機的

　　1.這個峰一般來說是C=O雙鍵的峰，可是你說是無機物，很有可能是某一個基團的倍頻峰，看看820左右或者是某兩個峰的疊加。

　　2.也有可能是你在測量過程當中由于激光引起的碳化物質。還有一種可能就是C=C.

　　3.拉曼在1610-1680波數區間有C=N雙鍵的強吸收