拉曼問題匯總：拉曼光譜百問解答總結（七）

  七十五.傅立葉變換拉曼光譜與激光拉曼光譜有什么區別?

　　1.基本有以下幾點：

　　(1)工作原理不一樣;

　　(2)傅立葉拉曼側重于有機樣品分析，用的是，近紅外激光器(1064nm)，能量較低信號弱。而色散型拉曼可選不同波長的激光器(200～800nm)，能量高，靈敏度高;

　　(3)使用傅立葉拉曼可減少樣品的熒光干擾;

　　(4)傅立葉拉曼價格便宜;

　　(5)現在基本買色散激光拉曼的用戶較多。

　　2.傅立葉拉曼測水和黑色陽平效果不好，因為，水和黑色樣品對紅外光的吸收都比較強，會導致本來就很弱的傅立葉拉曼信號會變的更弱。

　　七十六.激光拉曼光譜技術在生物分析中的應用研究?

　　活細胞拉曼光譜反映藥物等分布情況，DNA單分子熒光測試,癌變細胞光譜規律摸索。

　　七十七.為什么熒光會影響Raman譜?

　　1.拉曼測定的是分子受激發后的反射光，因此，對于有些物資如無定型的物質玻璃等會在測定中產生強烈的熒光干擾，將拉曼信號掩蓋。

　　現在對于熒光的消除一般是采用更換光源，通過改變激發波長避免熒光在測定的波數范圍內出現。

　　2.有時候做拉曼的時候熒光背景較強，就需要改變激發波長來消除熒光影響的。

　　七十八.在激光拉曼光譜儀中，儀器探測器項描述為：瑞利散射抑制O.D.>7。。。不明白其中物理意義?

　　激光激發拉曼后，拉曼光還是很弱(相比較激光和瑞利線)，為了能更好的測量拉曼，需要把激光濾除掉(用濾光片)，一般一個濾光片將激光減弱到十的負七次方，就是叫OD^-7(不好意思，輸入法不支持)。

　　例如雷尼紹的拉曼為了將激光減弱的與拉曼水平相當，就用了兩個濾光片，所以叫OD^-14。

　　七十九.我將做一個用光譜儀來測量細胞的散射光譜實驗，現在，有一臺海洋公司的型號是hr4000cg-uv-nir的光譜儀，不知可不可以用來測量細胞的散射光譜。

　　1.建議你使用專門的拉曼光譜儀來測量散射光譜;

　　2.要依據細胞的種類決定;

　　3.細胞可能比較難測量，我沒測過，但是可以簡單估計一下：

　　①細胞在可見區的熒光會很強，所以用可見過激發效果會不好;

　　②近紅外激光應該可以試一試;

　　3.傅立葉拉曼怕水，而細胞應該含有很多水吧，所以恐怕不適合;

　　4.用紫外光激發，恐怕會灼傷細胞。

　　八十.怎樣用簡單的方法判斷拉曼光譜的光路有偏差，除了看信號差以外?

　　信號差是最簡單，最明顯的。如果是，顯微拉曼，那么激光照射樣品并上下移動樣品臺，如果激光光斑一直是個均勻的同心圓并且發散聚攏均勻，那么激光光路就沒有問題，反之則不好。

　　信號光路看不到光，調起來復雜，只能根據信號來調。

　　八十一.看到一些文獻上當幾個峰重合時，用到分峰技術，常用的是計算機去卷積，請問各位大俠，有什么軟件或方法可以進行分峰處理?

　　1.在mat-lab中可以進行卷積和去卷積的計算，前提是你得稍微熟悉這些方法;

　　2. origin7.0可以，查一下說明書，按步驟來還是很簡單的，沒什么去卷積之類的。

　　八十二.比如，說我做了幾種礦泉水樣品的拉曼譜，發現出現一個未知的峰，我用什么方法知道這是什么物質呢?

　　1.Raman譜峰一般是重復性很好的.你所說的有是產生有時沒有的峰，如果，很銳利，應該就是宇宙峰了。

　　宇宙峰就是宇宙射線的影響產生的極其尖銳的峰，應當堅決去掉;好像一般在下午3點到7點的時候會經常出現這種影響，把它處理掉就行了。

　　※宇宙射線，也稱高能粒子流，是不經過光路，直接進入CCD的信號，一般儀器周圍有強磁場等干擾源的時候會很強烈，別且在下午或傍晚比較強。這些粒子一般只會打到CCD的一個像元上，因此形成的峰會很銳并且不具有高斯或者洛倫茨線形，因此，很容易辨認。

　　2.做一下純凈水樣品的測試，如果也在相同位置出現拉曼峰，則可歸因于儀器本底或純水的拉曼;另外，可查一查純水以及你最懷疑的礦物質的拉曼信息;

　　3.算出吸收譜的能量，查手冊。

　　八十三.請問激光拉曼光譜和紅外光譜有什么區別?

　　1.象形的解釋一下，紅外光譜是“凹”，拉曼光譜是“凸”，兩者互為補充。

　　2.

　　(1)從本質上面來說，兩者都是振動光譜，而且測量的都是基態的激發或者吸收，能量范圍都是一樣的;

　　(2)拉曼是一個差分光譜，形象的來說，可樂的價錢是1毛錢，你扔進去1毛錢，你就能得到可樂，這是紅外;可是如果你扔進去1塊錢，會出來一瓶可樂和9毛找的錢，你仍舊可以知道可樂的價錢，這就是拉曼;

　　(3)光譜的選擇性法則是不一樣的，IR是要求分子的偶極矩發生變化才能測到，而拉曼是分子的極化性(polarizibility)發生變化才能測到;

　　(4)IR很容易測量，而且信號很好，而拉曼的信號很弱;

　　(5)使用的波長范圍不一樣，IR使用的是紅外光，尤其是中紅外，好多光學材料不能穿透，限制了使用，而拉曼可選擇的波長很多，從可見光到NIR，都可以使用;

　　※當然了還有很多不同的地方，比如，制樣方面的，IR有時候相對比較的復雜，耗時間，而且可能會損壞樣品，但是拉曼并不存在這些問題。

　　(6)拉曼和紅外大多數時候都是互相補充的，就是說，紅外強，拉曼弱，反之也是如此!但是，也有一些情況下二者檢測的信息是相同的。

　　3.本質上是這樣的，紅外是吸收光譜，拉曼是散射光譜，偶老板告訴我的，雖然他不是做這個方面的。

　　※紅外是當被測分子被一定能量的光照射是，分子振動能級發生躍遷，同時，由于分子的振動能量高于轉動能級，那樣，振動的同時，肯定含有轉動，所以，紅外是分子的振轉吸收，也就是它將能量吸收。

　　拉曼是當一束光子撞擊到被測分子上時，從量子力學上講，光子與分子發生非彈性碰撞，光子的能量經過碰撞之后增加或者減少，這樣，就是拉曼散射;也就是說光子的能量沒有完全吸收，當然，也有完全彈性碰撞，那種情況不是拉曼散射，是瑞利散射。從能級的角度來講拉曼散射，是分子先吸收了光子的能量，從基態躍遷到虛態，到了虛態之后，由于，處于高能級，它從虛態返回到第一振動能級，釋放能量，這樣放出的光子的能量小于入射光子的能量，這樣就是拉曼散射的一種，也就是，處于斯托克斯散射。當，從第一振動能級躍遷到虛態，然后，從虛態返回到基態，這樣放出的能量就大于入射光的能量，這就是反斯托克斯區，也是拉曼散射的一種，能量不變的就是銳利散射。

　　4.有些振動紅外和拉曼都能檢測到，有些振動只有其中一個能檢測，比如，氧氣、氮氣只能用拉曼檢測。

　　紅外不能檢測低于400波數的。紅外更適合用于有機物，拉曼更適合無機物。紅外受水的干擾比較大。