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  • 發布時間:2019-04-30 21:49 原文鏈接: 按細胞比重分離B細胞

    按細胞比重分離B細胞

    1.23ml3×107純化的B細胞(B細胞>90%)的細胞懸液加到3ml Percoll溶液(比重1.074)上,水平離心1000×g 20分鐘。

    2.吸去無細胞上清液,交界面的低密度B細胞和大部分Percoll溶液。由于此時細胞沉淀非常松散,需留下約0.2ml Percoll溶液以防吸去了沉淀細胞。輕敲離心管,用留下的液體懸浮高密度B細胞。

    3.用洗滌液分別洗滌低密度B細胞和高密度B細胞兩次,每次離心500×g 10分鐘。最后,測定細胞數和細胞活力,用12ml5%小牛血清的洗滌液將細胞配成適當濃度。


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