·在CELLection? Dynabeads? 磁珠的包被過程中,對靶標抗體的數量進行滴定/優化。
·如果目的細胞的數量很低,或細胞表面的靶標抗原濃度很低,則推薦使用間接法技術。
·使用>1 x 10E7個磁珠/mL樣品(>25 μL)。
·在使用前對全血樣本進行洗滌。
·為了確保獲得最高效率的細胞釋放效果,絕對不要在溶解凍干DNA酶的過程中渦旋DNA酶溶液。
·在釋放細胞的過程中,請將新鮮配制的RPMI/1% FCS預熱至37°C。
·確保緩沖液的pH值在7.0-7.4之間以獲得理想的DNA酶I活性。更高的pH值會抑制DNA酶的活性。
·RPMI中應含有足量的Mg2+以幫助DNA酶發揮活性。
·當細胞與DNA酶釋放緩沖液孵育后,在使用磁力架分離之前對磁珠-細胞混合物進行徹底的吹打非常重要,這樣可提供機械力打斷DNA連接。未仔細吹打細胞將會降低細胞的得率。