提高LN229腫瘤細胞培養存活率和生長率措施

根據人們的經驗，腫瘤細胞在體外不易培養，建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后，常出現以下幾種情況：

完全無細胞游出或移動；

有細胞移動和游出，但無細胞增殖，細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代；

有細胞增殖，傳若干代后停止生長或衰退死亡；

傳數代后細胞增殖緩慢，經過一段停滯期后，才又呈旺盛生長狀態，形成穩定生長的腫瘤傳代細胞系。

以上現象說明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求，并需經過對新環境的適應才能生長，因此欲獲得好的培養效果，不能局限于一般培養法，必須采用一些特殊的措施。

1．適宜底物：把經過純化的細胞接種在不同的底物上，如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。

2．生長因子：應用促細胞生長因子，向培養液中增加一種或幾種促細胞生長因子。根據細胞種類不同選用不同的促生長物，常用有胰島素、氫化Ke的松、雌激素以及其它生長因子。

為提高腫瘤細胞對體外培養環境的適應力和增加有活力癌細胞（干細胞）的數量，可采用動物體轉嫁接種成瘤后，再從動物體內取出進行培養，能提高體外培養的成功率。受體動物以裸鼠Hao。

3.動物體媒介培養方法：

（1）瘤塊接種：取新鮮瘤組織，用Hanks液洗凈血污，切成1～3毫米小塊，用穿刺針頭吸一小瘤塊，用酒精棉球擦拭動物腹部后，直接刺入皮下，注入瘤塊；

（2）飼養觀察，待腫瘤生長達較大體積后，剝取出瘤組織；

（3）進行體外培養。

（4）為防止失敗，仍取部分瘤組織繼續在裸鼠體內傳代。通過裸鼠媒介接種，有活力的腫瘤細胞數量增多，細胞培養易于成功。

腫瘤細胞培養方法與培養正常細胞完全相同，但成功率比正常細胞高。